蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR)

PK; PyK; PK1; PKL; Pyruvate Kinase Isozymes R/L; Glutamic--pyruvic transaminase 1; R-type/L-type pyruvate kinase; Red cell/liver pyruvate kinase

型號：GOY-01D133

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Arachidonate Lipoxygenase 3 (ALOXE3)  產(chǎn)品名稱：花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Acid Phosphatase 2, Lysosomal (ACP2)  產(chǎn)品名稱：溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Kallikrein 2 (KLK2)  產(chǎn)品名稱：激2(KLK2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase (NAGLU)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Ribonuclease III, Nuclear (RNASEN)  產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶Ⅲ(RNASEN)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Ribonuclease L (RNASEL)  產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶L(RNASEL)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細胞色素P450 17抗體 CYP17

碳酸酐酶9抗體 Carbonate dehydratase IX

細胞色素P450 7A1抗體/7a羥化酶 CYP7A1

24羥化酶抗體 CYP46

乳腺腫瘤新因子1抗體 CHRDL2

25α7羥化酶抗體 CYP7B1

細胞角蛋白3+12抗體 Cytokeratin 3+12

接頭蛋白CrkL抗體 Crkl

細胞色素P450 2R1抗體 CYP2R1

銅代謝結構域蛋白10抗體 COMMD10

細胞色素P450 24A1抗體 CYP24A1

鈣周期素結合蛋白抗體 CACYBP

丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重組蛋白大鼠小鼠小腸隱窩上皮細胞培養(yǎng)基光帽鱗傘 Pholiota nameko

NIH3T3全細胞裂解液大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)ACHN(人腎細胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

柱孢綠僵菌 Metarhizium eylindrosporae

人主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

人大細胞肺細胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

801-D (人巨細胞性肺細胞)恒河猴腎細胞

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisA549/DDP, 人肺腺耐藥細胞株

異常畢赤酵母 Pichia anomala銅綠假單胞菌 Pseudomnas aeruginose

香菇 Lentinula edodes

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞)5×106cells/瓶×2