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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-02 14:52:17瀏覽次數(shù):241次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D122 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Galactosidase Beta (GLb) |
物種 | Rhesus monkey (Simian,恒河猴) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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英文名稱:Recombinant Catalase (CAT) 產(chǎn)品名稱:過氧化氫酶(CAT)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant Catalase (CAT) 產(chǎn)品名稱:過氧化氫酶(CAT)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
英文名稱:Recombinant Catalase (CAT) 產(chǎn)品名稱:過氧化氫酶(CAT)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白恒河猴 | Rhesus monkey (Simian,,恒河猴) | GOY-01D122 |
產(chǎn)品名稱:半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白恒河猴
英文名稱:Recombinant Galactosidase Beta (GLb)
GL-B; b-GAL; bGAL; ELNR1; EBP; GLB1; Lactase; Elastin Receptor 1,67kDa; Elastin Receptor 1(67kD); Acid Beta-Galactosidase
型號(hào):GOY-01D122
酶與激酶
代謝通路
物種:Rhesus monkey (Simian,恒河猴)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:-
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
磷酸化Bcl-10抗體 phospho-Bcl 10 (Ser218)
原癌基因Bcl-6抗體 Bcl-6/5
磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 phospho-Bim(Ser87)
磷酸化B-Raf抗體 phospho-B-Raf (Ser365)
磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 Phospho-BRCA1 (Ser1524)
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣1抗體 BMAL1
乳腺癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體 BRCC3
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體 BAMBI
膽綠素還原酶抗體 Biliverdin Reductase
BIVM蛋白抗體 BIVM
B淋巴細(xì)胞淋巴瘤因子9抗體 BCL9
血型Lewis A抗原抗體 Blood Group Lewis a
半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白恒河猴綠色木霉無花果曲霉 Aspergillus ficuum
HA(人羊膜細(xì)胞)煙色紅曲 Monascus fuliginosus
球孢白僵菌 Beauveria bassiana尖孢鐮刀菌棉花?;?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
平山正青霉 Eupenicillium hirayamae涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
Sf-21(昆蟲細(xì)胞)大鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeNCI-N87 [N87]人胃細(xì)胞
Streptavidin-HRP(Ready to Use)/Streptavidin-HRP(IHC工作液)洛格酵母 Saccharomyces logos
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae爪哇根霉 Rhizopus javanicus
人卵巢細(xì)胞柄木霉*
阿魏側(cè)耳 Pleurotus ferudae豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner
大鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
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