產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)

ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

型號(hào)：GOY-01D111

酶與激酶

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：53.3kDa

實(shí)際分子量：53kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ile30~Gln247 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液,，（pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01%skl, 5% Trehalose and Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：8.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 5 (GSTa5)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶α5(GSTa5)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 2 (GSTa2)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶α2(GSTa2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱：超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱：超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱：超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

英文名稱：Recombinant Calpain 1 (CAPN1)  產(chǎn)品名稱：鈣1(CAPN1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

B淋巴細(xì)胞激酶抗體 BLK

乳腺癌相關(guān)基因2抗體（鋅指蛋白364） BCA2

腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體 BAI2

促凋亡BNIP3L蛋白抗體 BNIP3L

Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體 BAG3

BCL2樣10促凋亡蛋白抗體 BCL2L10

BCL2樣12含蛋白抗體 BCL2L12

BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體 BAG5

Bcl2相互作用蛋白2抗體 BNIP2

乳腺癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體 BASC4

轉(zhuǎn)錄因子BTF3抗體 BTF3

磷酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體 Phospho-Bcr (Tyr360)

中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白人膠紅酵母 Kocuria rosea異常漢遜酵母 Hansenula anomala

BT-549(人腺管細(xì)胞)厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

玉蜀黍赤霉 Gibberella zeaePC-3M(人前列腺細(xì)胞)

中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis強(qiáng)壯根瘤菌 Rhizobium validum

黑木耳 Auricularia auricula鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum16HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞)

卡爾斯伯酵母 Saccharomyces carlsbergensisMiaPaCa-2, 人胰腺細(xì)胞

施氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri宛氏擬青霉

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeHGC-27(人胃細(xì)胞)

銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa米根霉 Rhizopus oryzae

苜蓿中華根瘤菌NCI-H524(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)

大鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基