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產(chǎn)品名稱:總抗氧化能力(ABTS法)可見分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 可見分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6441
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平,。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿,、血清,、唾液、尿液等各種體液,,細(xì)胞或組織等裂解液,、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測(cè)定原理:
ABTS法是使用*泛的間接檢測(cè)方法,,可用于親水性和親脂性物質(zhì)抗氧化能力測(cè)定,。ABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)定的藍(lán)綠色陽離子自由基 ABTS+,,能溶于水相或酸性乙醇介質(zhì)中,在734nm處有最大吸收,。被測(cè)物質(zhì)加入ABTS+溶液后,,所含抗氧化成分能與ABTS+發(fā)生反應(yīng)而使反應(yīng)體系褪色。在734nm檢測(cè)吸光度的變化,,并以Trolox作為對(duì)照體系量化抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力,。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī),、分光光度計(jì),、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表:
![圖1.jpg 圖1.jpg](https://img73.chem17.com/6fd5d5abffebbb9ee0327440cf20a8dab186447dc68a808d252c21a82ebd76a4b3072d0fa48baf1e.jpg)
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液,。
酵母蛋白酶抑制劑1mL PAGE 膠長(zhǎng)加樣槍頭1盒
His 標(biāo)簽蛋白專用蛋白酶抑制劑10mL Paclitaxel(TAXOL)( )100μL
組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑1mL OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
α2巨球蛋白25Inh.U Origami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
AEBSF 溶液,10mg/mL5mL Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30 次 鳥類種屬鑒定 PCR Mix100 次
微量 RNA 助沉劑0.1mL 尼龍膜,,13×20cm1張
微量 DNA 助沉劑0.1mL 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA 級(jí) Acryl 助沉劑1mL 內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)5mL
彩色 Acryl 助沉劑1g 內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)50mL
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠S100B蛋白(S-100B)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠S100B蛋白(S100B)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠S100B蛋白(S-100B)elisa檢測(cè)試劑盒
總抗氧化能力(ABTS法)可見分光光度法測(cè)試盒填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次 接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次 接頭 DNA(pSma I)5nmol
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記專用 )0.5mL 接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
標(biāo)記 dUTP 溶液50μL 接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol
Aminoally-dUTP 溶液,,10mM100μL 接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。