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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-14 13:24:26瀏覽次數(shù):206次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法測(cè)試盒
CAS | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 | 純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 | 分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 |
貨號(hào) | GOY-01S6461 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 產(chǎn)品僅用于科研 |
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測(cè),。避免給您帶來(lái)不必要的損失,,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明,!
產(chǎn)品名稱:超氧陰離子清除能力微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6461
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基,,可攻擊生物大分子,,如脂質(zhì),、蛋白質(zhì),、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注,。
測(cè)定原理:
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,,在530nm處有特征吸收峰,,樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平,、低溫離心機(jī),、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,、恒溫水浴鍋,。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存,;
測(cè)定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液,。
0酸化鉀ATP酶蛋白a1抗體 自噬相關(guān)蛋白4A抗體
0酸化內(nèi)收蛋白a1抗體 自噬相關(guān)蛋白3抗體
0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α1抗體 自噬相關(guān)蛋白1抗體
酸性神經(jīng)酰胺酶1抗體 自噬相關(guān)蛋白18抗體
0酸化腎上腺素能受體β2抗體(β2-AR ) 自噬相關(guān)蛋白16A抗體
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FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,,1cm,;V樣:加入樣本體積,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g。
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