詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,,請仔細閱讀購買說明,!
產(chǎn)品名稱:多功能氧化酶(MFO)微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6475
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng),,可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出,;還可產(chǎn)生激活反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì),,導(dǎo)致毒性增強,,成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究,,對于從分子生物學(xué)水平上進一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義,。
測定原理:
MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基苯酚,在405nm下有特征吸光值,。
自備用品:
分光光度計,、臺式離心機、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存;
測定步驟
1,、 分光光度計預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,,棄沉淀,,取上清在4℃,8000g離心10min,,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液,。
鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體 雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體
細胞毒性T細胞抗原-4抗體 雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體
緊密連接蛋白1抗體 雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體
胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白 雄激素受體抗體
酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體 雄激素受體復(fù)合物相關(guān)蛋白/核受體相互作用蛋白抗體
大鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa檢測試劑盒
大鼠堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)elisa檢測試劑盒
大鼠腱蛋白(CHRD)elisa檢測試劑盒
大鼠降鈣素(CT)elisa分析檢測試劑盒
大鼠降鈣素(CT)elisa檢測試劑盒
多功能氧化酶(MFO)微量法測試盒人白細胞分離液 1.078200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個
人中性粒細胞分離液 1.085200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個
人粒細胞分離液 1.113200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個
小鼠腫瘤細胞分離液 1.070200mL
小鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.071200mL
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,,1mL,;T:反應(yīng)時間,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,,g,。