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產(chǎn)品名稱：磷脂酶A2（PLA2）微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測試方法: 微量法
貨號：GOY-01S6652
分類：脂肪酸代謝系列
商品介紹：
磷脂酶A2（EC3.1.1.4）是磷脂sn-2位脂?；饷福瑥V泛存在于動植物組織,、細菌,、細胞核分泌物中，參與脂肪消化,，成熟,、細胞信號傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù),、宿主反應(yīng)等生理過程,，在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機體新陳代謝,、參與疾病的病理進程等方面發(fā)揮著及其重要的作用,。

測定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸膽堿（HEPC）產(chǎn)生游離巰基，與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),，在412nm處有特征吸收峰,。

自備實驗用品及儀器

天平、超速冷凍離心機,、研缽,、可見分光光度計、微量石英比色皿,。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存；
測定步驟
1,、 分光光度計預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W,，破碎3s,，間歇7s，總時間1min）,，然后4℃,，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液,。
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磷脂酶A2（PLA2）微量法測試盒大片段 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)50μg  凝固血液 DNAout30 次

脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次  凝固血液 DNAout100 次

脈沖電泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次  鎳柱介質(zhì)2mL

脈沖電泳 Marker( 低范圍 PFG)50 次  鎳柱介質(zhì)10mL

超螺旋 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)100uL  尿道上皮細胞生長因子5mL
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應(yīng)時間，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,。