詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱(chēng):游離膽固醇(FC)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6644
分類(lèi):脂肪酸代謝系列
商品介紹:
膽固醇廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi),尤以腦及神經(jīng)組織中最為豐富,,在腎,、脾、皮膚,、肝和膽汁中含量也高,。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素,、性激素,、膽汁酸等生理活性物質(zhì)的重要原料,也是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,,其血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo),。動(dòng)脈粥樣硬化、靜脈血栓形成與膽石癥與高膽固醇血癥有密切的相關(guān)性,。
測(cè)定原理
游離膽固醇在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2,,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,經(jīng)過(guò)氧化物酶作用下生成紅色醌類(lèi)化合物,其顏色深淺與FC含量成正比,。
自備用品
可見(jiàn)分光光度計(jì),、水浴鍋、可調(diào)式移液槍,、1ml玻璃比色皿,、雙蒸水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測(cè)定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,,棄沉淀,取上清在4℃,,8000g離心10min,,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液,。
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3C抗體 組蛋白去甲基化酶JMJ2A抗體
載脂蛋白C1抗體 組蛋白去甲基化酶JARID2抗體
載脂蛋白C2抗體 組蛋白去甲基化酶JARID1B抗體
載脂蛋白L1抗體 組蛋白去甲基化Jarid1C抗體
載脂蛋白L4抗體 組蛋白連接作用蛋白抗體
大鼠白介素2受體α(IL2Rα)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素2受體β(IL2Rβ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素3(IL3)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素3(IL-3)elisa檢測(cè)試劑盒
游離膽固醇(FC)微量法測(cè)試盒大提柱式真菌 RNAout5次 柱式鼠尾 DNAout50 次
細(xì)菌 RNAout100 次 柱式拭子 DNAout50 次
細(xì)菌 RNAout250 次 柱式石蠟包埋組織 DNAout30 次
葡萄球菌 RNAout50 次 柱式石蠟包埋組織 DNAout2.0(二代測(cè)序?qū)S茫?/span>50 次
分枝桿菌 RNAout50 次 柱式軟體動(dòng)物 DNAout50 次
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,,1mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。