【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,，請仔細閱讀購買說明,！
產(chǎn)品名稱：蔗糖酶可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號：GOY-01S6695
分類：蔗糖系列
商品介紹：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關(guān)鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收,。

測定原理

本試劑盒采用3.5－二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產(chǎn)生的還原糖的含量,，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5－二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物,，在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應液的顏色深度成正比,。此法操作簡便、迅速,、雜質(zhì)干擾較小。

所需的儀器和用品

可見分光光度計、沸水浴,、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存,；
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm,，蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘,。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W,，破碎3s,，間歇7s,，總時間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液,，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液。
癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子21抗體     微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體

貓眼綜合征染色體候選基因5抗體     微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體     微管相關(guān)蛋白抗體

跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體     微管相關(guān)蛋白Tau421抗體

分子伴侶CESK1蛋白抗體     微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體
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蔗糖酶可見分光光度法測試盒成纖維細胞生長因子5mL  Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg

成纖維細胞生長因子 -25mL  FTA 血片 DNAout50 次

成纖維細胞生長因子 - 不含動物成分5mL  Forskolin( 腺苷酸環(huán)化酶激活劑 )1mg

動物上皮細胞生長因子5mL  Fluorescein-5-maleimide25mg

肝細胞生長因子5mL  Fluorescein-12-dUTP 溶液,，1mM25μL
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應體系總體積,，1×10-3 L,；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑,，1cm；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL,；V樣總：加入提取液體積，1mL,；T：反應時間,，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g。