商品介紹：
果膠是一類廣泛存在于植物細胞壁的初生壁和細胞中間片層的雜多糖,。半乳糖醛酸是果膠酸的組成單位，也是果膠的主要成分,，存在于植物的粘液,、樹膠和細菌多糖中,。

測定原理

半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,，5-甲?；?/span>-2-呋喃甲酸與3,5-二酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)，在450nm下有最大吸光值,。

自備實驗用品及儀器

天平,、低溫離心機、分光光度計,、1mL玻璃比色皿,、恒溫水浴鍋、硫酸,、蒸餾水。

產(chǎn)品名稱：半乳糖醛酸可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號：GOY-01S7001
分類：光合作用系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶,，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存；
測定步驟
1,、 分光光度計預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W,，破碎3s,，間歇7s，總時間1min）,，然后4℃,，8000g離心10min，取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃,，200g離心5min,，棄沉淀，取上清在4℃,，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二,，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液,，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L,；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑,，1cm,；V樣：加入樣本體積，0.1 mL,；V樣總：加入提取液體積,，1mL；T：反應(yīng)時間,，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明,！
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