服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,,比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費代測,。公司產(chǎn)品僅用于科研
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,,容量瓶等
![](https://img76.chem17.com/ebd03a134538f5061f931717885dff650f215ea3993e69d7036baf6cab2f22fc38f5afb1f3440510.png)
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照)
LLC 小鼠肺癌細胞
HBL-100人整合SV40基因的上皮細胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-19
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照)
LLC 小鼠肺癌細胞
HBL-100人整合SV40基因的上皮細胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標(biāo)簽)
人成纖維細胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 Mouse
PRELP Others Human 人 PRELP 人細胞裂解液 (陽性對照)
淋巴成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I 淋巴瘤細胞,EL4. IL-2細胞 K6H6/B5細胞,,鼠雜交骨髓瘤細胞
人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]
MSR1 Others Mouse 小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CK-19人細胞角蛋白19elisa應(yīng)用MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞
Raji,,人Butt's淋巴瘤細胞
Saos-2,人成骨肉瘤細胞
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,最好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn),。