詳細(xì)介紹
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,,一次檢測樣品較多時(shí),最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,,容量瓶等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Apaf-1 Elisa Kit | 96T/48T | GOY-0291E |
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶,。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計(jì)
算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn)。
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12
Calu-3細(xì)胞,,人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞 CM-M089小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cell
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12
Calu-3細(xì)胞,,人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞 CM-M089小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
PGLYRP1 Others Mouse 小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHTSMC NA
HT1080 人成纖維瘤細(xì)胞
CL-0352HFF-1(人成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2 人胎盤羊膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人凋亡蛋白酶激活因子1elisa測定試劑盒Ca Ski, 人細(xì)胞 Human 現(xiàn)貨
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 Human 現(xiàn)貨
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費(fèi)代測,。公司產(chǎn)品僅用于科研