需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,,一次檢測樣品較多時(shí),,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
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樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,最好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計(jì)
算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn)。
植物總抗氧化能力ELISA試劑盒 英文縮寫,; T-AOC
植物總ELISA試劑盒 英文縮寫,; t-Pro
植物總ELISA試劑盒 英文縮寫; t-Pro
植物核孤兒受體4A1ELISA試劑盒 英文縮寫,; OR4A1
植物9-順式環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; NCED
人生長分化因子7ELISA試劑盒 英文縮寫; GDF7
人生長分化因子9ELISA試劑盒 英文縮寫,; GDF-9
人生長激素ELISA試劑盒 英文縮寫; GH
人生長激素促分泌素受體內(nèi)源性配體ELISA試劑盒 英文縮寫,; ghrelin
人生長激素結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 英文縮寫,; GHBP
植物多胺氧化酶ELISA試劑盒 英文縮寫; PAO
植物多巴色素互變酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; DTT
植物多酚氧化酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; PPO
植物多聚ADP核糖聚合酶ELISA試劑盒 英文縮寫; PARP
植物兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; COMT
OSM 人抑瘤素Melisa實(shí)驗(yàn)原理人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA試劑盒 英文縮寫,; IGFBP-1
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2ELISA試劑盒 英文縮寫; IGFBP-2
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3ELISA試劑盒 英文縮寫,; IGFBP-3
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4ELISA試劑盒 英文縮寫,; IGFBP-4
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-6ELISA試劑盒 英文縮寫; IGFBP-6
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,,比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,,有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費(fèi)代測,。公司產(chǎn)品僅用于科研