詳細介紹
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,,容量瓶等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Human Cyclin-D1 Elisa Kit | 96T/48T | GOY-0309E |
樣品準備:
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未
用完,,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標準品孔第一孔的 OD 值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準。
植物總?cè)~綠素ELISA試劑盒 英文縮寫,; Total chlorophyll
植物花青素合成酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; ANS
植物黃烷酮3-羥化酶ELISA試劑盒 英文縮寫; F3H
植物查爾酮合酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; CHS
植物查爾酮異構(gòu)酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; CHI
人趨化因子配體5ELISA試劑盒 英文縮寫,; CCL5
人曲霉菌ELISA試劑盒 英文縮寫; a.nidietans
人ELISA試劑盒 英文縮寫,; NE
人全段甲狀旁ELISA試劑盒 英文縮寫,; i-PTH
人全反鈷胺素II型ELISA試劑盒 英文縮寫; HoloTC II
植物N-乙酰-5-羥色胺甲基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; Ac SNMT
植物N-乙酰葡糖胺ELISA試劑盒 英文縮寫,; G6PD
植物PRAC蛋白ELISA試劑盒 英文縮寫; PRAC
植物P型ATP酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; P-ATPases
植物P選擇素ELISA試劑盒 英文縮寫,; P-Selectin
人細胞周期素D1elisa測定試劑盒人血管活性腸肽ELISA試劑盒 英文縮寫; VIP
人血管緊張素1-7ELISA試劑盒 英文縮寫,; ANG 1-7
人血管緊張素ⅠELISA試劑盒 英文縮寫,; Ang-I
人血管緊張素ⅡELISA試劑盒 英文縮寫; Ang-Ⅱ
人血管緊張素Ⅱ受體1ELISA試劑盒 英文縮寫,; ATR-1
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測試劑盒,,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測,。公司產(chǎn)品僅用于科研