注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，最好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計(jì)
算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準(zhǔn),。

服務(wù)：
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費(fèi)代測,。公司產(chǎn)品僅用于科研

需要而未提供的試劑和器材：
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí),，最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,，容量瓶等

樣品準(zhǔn)備：
1）血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶,。酶是一種有機(jī)催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)

CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

MEF-7/Adr細(xì)胞，腺癌耐藥株 人卵巢癌細(xì)胞,HOC1細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞裂解物HMFL

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2

ICAM3 Others Human 人 CD5
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)

CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

MEF-7/Adr細(xì)胞,，腺癌耐藥株 人卵巢癌細(xì)胞,HOC1細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞裂解物HMFL

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2

ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS

HEC-1-B 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞

ACHN人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 ACHN human renal cell carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

TNF Protein Mouse 重組小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

大鼠顆粒細(xì)胞(RGC)(1×106) U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human
GIP人胃抑素ELISA定量試劑盒EMT-6   小鼠癌

F9   小鼠畸胎瘤細(xì)胞

FO   小鼠骨髓瘤細(xì)胞

H22   小鼠肝癌細(xì)胞