詳細(xì)介紹
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱: Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚(yú)等。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔、待測(cè)樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值,。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過(guò)高,,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),,可和所購(gòu)經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
糖蛋白胨培養(yǎng)液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RN-c, 大鼠質(zhì)神經(jīng)元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
中國(guó)藍(lán)薔薇酸瓊脂250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Ca Ski(人宮頸上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
RWPE1(人前列腺上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱:DCS
Bcap-37(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成年表角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格:1ml
人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
M9肉湯/M9 BrothBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人卵巢透明細(xì)胞細(xì)胞英文名稱:ES-2
超級(jí)瓊脂/Super AgarBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人 B 淋巴母細(xì)胞英文名稱:HMy2.CIR PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent (5 ea) PPARγ (human recombinant),; PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent
Cell-Based Assay Cyclosporin A (50 ul) Cell-Based Assay Cyclosporin A
Hexadecyl Methyl Glycerol (50 mg) 1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol; 1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-Glycerol,; Hexadecyl Methyl Glycerol
7-hydroxycoumarinyl Arachidonate (5 mg) 5Z,,8Z,11Z,,14Z-eicosatetraenoic acid,, 2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl ester; Umbelliferyl Arachidonate,; 7-hydroxycoumarinyl Arachidonate
SMase Acid Solution (1 ea) SMase Acid Solution
Glycogen Hydrolysis Buffer (8 ml) Glycogen Hydrolysis Buffer
N-(3-pyridyl)-Indomethacin amide (5 mg) N-(3-pyridyl)-1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-2-methyl-1H-indole-3-acetamide,; N-3PyIA; N-(3-pyridyl)-Indomethacin amide
3,,4-Dihydroxyphenyl ethanol (5 mg) 4-(2-hydroxyethyl)-1,,2-benzenediol; 3-Hydroxytyrosol|Ba2774; 3,,4-Dihydroxyphenyl ethanol
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Clasto-Lactacystin β-lactone (50 ug) 1R-[1S-1hydroxy-2-methylpropyl]-4R-methyl-6-oxa-2-azabicyclo[3,。2。0]heptane-3,,7-dione,; β-Clastolactacystin|Omuralide; Clasto-Lactacystin β-lactone
Nitrate Reductase (LDH method) (1 ea) Nitrate Reductase (LDH method)
ODQ (10 mg) 1H-[1,,2,,4]oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one,; ODQ
DAF-2 diacetate (500 ug) 2-(3,,6-diacetyloxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid,; 4,,5-Diaminofluorescein diacetate; DAF-2 diacetate