雞層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Chicken Laminin,LN ELISA Kit       檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,，操作簡(jiǎn)便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱： Chicken Laminin,LN ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑,，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水,、組織等。
種屬：人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚等,。
雞層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定,，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿,，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
雞層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或 者細(xì)胞超聲粉碎,，離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清：在室溫下,，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘，收集上 清,。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液,，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
雞層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1. 取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）,、空白孔,、待測(cè)樣品組,。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性,，建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）,。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔,，靜置 15-30s,，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干,。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液,。 9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí),，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,，如果顏色較深,，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本）,，如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
雞層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PC-3(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

PC-3M(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MGC80-3（MGC-803）人胃細(xì)胞gersion

NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HNE2, 人鼻咽細(xì)胞系

B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

DLD-1(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠下結(jié)締組織細(xì)胞英文名稱：L Wnt-3A

AEC Kit/AEC底物顯色試劑盒20ml國產(chǎn)

豚鼠膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱：GPS5

3.5% NaC1精氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

人腎動(dòng)脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

NZYM瓊脂/NZYM AgarBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口

人角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

酚紅葡萄糖肉湯發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

雞胚成纖維細(xì)胞英文名稱：DCE

卵磷脂（蛋黃）/蛋黃軟磷脂/磷脂酰膽堿/蛋黃卵磷脂/磷脂蛋黃素/Lecithin from egg yolkBR10克國產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HCT-15(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基/Sabouraud′s Agar，Modified真菌檢測(cè)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基/Manganese Nutrient Agar Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

胃蛋白胨BR250克國產(chǎn)/進(jìn)口

SW480(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Poly-D-lysine溶液規(guī)格：2mggersion N-    DBZ

β-NMN,， β-Nicotinamide ribose monophosphate， NMN,， Nicotinamide ribotide,， Nicotinamide-1-ium-1-β-D-ribofuranoside 5’-phosphate β-Nicotinamide mononucleotide

PBS Blocking Buffer EZBlock （PBS） Blocking Buffer

Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V,， Fatty Acid Low,， pH – 7.0    Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V,， Fatty Acid Low,， pH – 7.0

PtdIns-(1-arachidonoyl-d8, 2-arachidonoyl) (sodium salt) (100 ug)    etraenoyl-5,6,8,9,11,12,14,15-d8-2R-(5Z,8Z,11Z,14Z)-eicosatetraenoylphosphatidyl)inositol, monosodium salt,； PtdIns-(1-arachidonoyl-d8, 2-arachidonoyl) (sodium salt)

雞層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 Ac-Ala-Asn-Trp-rhodamine 110    Ac-Ala-Asn-Trp-rhodamine 110

Geldanamycin    Geldanamycin

L-myo-Inositol-1,4,5-triphosphate -sodium salt) (5 mg)  D-myo-Inositol-3,5,6-triphosphate (sodium salt)|Ins(1,4,5)P3 (sodium salt)|1,4,5-IP3 (sodium salt), L-myo-Inositol-1,4,5-triphosphate -sodium salt), 3,5,6-tris(dihydrogen phosphate)D-myo-inositol

Bupropion -hydrochloride) (100 mg)  NSC 315851, Bupropion -hydrochloride), 1-(3-chlorophenyl)-2-[(1,1-dimethylethyl)amino]-1-propane, monohydrochloride

16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2 (50 mg)    16-phenoxy tetranor PGE2, 16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2, 9-oxo-11a,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,2-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid

G9a Acceptor Peptide (600 ul)   G9a Acceptor Peptide

TF1 CPG 500 的EDANS替代品  Tide Fluor 1 CPG [TF1 CPG] 500  Superior replacement to EDANS