雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit       檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,，特異性強，重復性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存，操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱： Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑,，不得用于臨床診斷,。
標本：血清、血漿,、細胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等。
種屬：人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚等,。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘）,，微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定,，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿,，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法樣品收集,、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次,，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,，通過反復凍融,，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或 者細胞超聲粉碎,，離心取上清液檢測,。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測。
4. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘，收集上 清,。
5. 體液：包括胸腹水,、腦脊液，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
6. 組織標本：切取組織標本,，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測,，應將其分裝，-70 ℃保存,，避免反復冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心,。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘,。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設標準 品組（6 個濃度）,、空白孔、待測樣品組,。 注：為減少實驗誤差,，保證準確性，建議設置復孔,。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）,。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔,，靜置 15-30s,，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干,。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液,。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染,。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性,。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋,，計算結(jié)果時乘以相應的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本）,，如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗,。
2． 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

兔抗羊IgG（免疫血清）   0.5ml   支

SABC(小鼠/兔IgG)-POD kit    100-200T    盒

50×TAE 緩沖液  500ml   瓶

通用引物 ITS5 (10uM)    250ul   支

MRS肉湯 250g    瓶

L-Cysteine hydrochloride anhydrous L-鹽酸半胱氨酸   25g 瓶

[I125] Human HDL I125放射性標記高密度脂蛋白 300uCi  瓶

SOD 超氧化物岐化酶(來源牛紅細胞)    15KU    瓶

Linezolid 利奈唑酮  5g  瓶

Evans Blue 埃文斯藍 1g  瓶

Hoechst 33342染色液(即用型) 10ml    瓶

Solar Fluor 555（效果同Alexa Fluor 555）    5 mg    支

兩性電解質(zhì)pH3-10 40%    12ml    瓶

Pig Bile salt 豬膽鹽    25g 瓶

HPD600大孔吸附樹脂  500g    瓶

8-苯胺-1-萘磺酸 8-Anili-naphthalenesulfonic acid-ANSA   25g 瓶

Syringaldehyde 丁香醛   5g  瓶

4-Aminobenzoic acid 對氨基苯甲酸    25g 瓶

PPO 2,5-二苯基噁唑  5g  瓶

稱量紙 75mm×75mm   100張-包    包

(直徑)13mm水系濾器  0.45um  個

5ml注射器 國產(chǎn)  1支 袋

L-Phenylalanine L-苯丙氨酸  63-91-2 200mg

Levodopa 左旋多巴   59-92-7 20mg

Epinephrine hydrochloride 鹽酸腎上腺素  329-63-5    100mg

Methyl eugenol 甲基丁香酚   93-15-2 20mg

黑木耳多糖      20mg 6-（（2-（（4-（2,，4-Dichlorophenyl）-5-（4-methyl-1H-imidazol-2-yl）pyrimidin-2-yl）amino）ethyl）amino）nicotinonitrile； CT99021 EZSolution CHIR99021,， Sterile-Filtered

AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate,； SAMe  S-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate

Z-Val-Phe-CHO； Carbobenzoxy-valinyl-phenylalaninal,； Calpain Inhibitor III MDL 28170

L-Threoascorbic acid,， Antiscorbutic factor， Vitamin C L-Ascorbic acid

5-[2,，4-Bis[（3S）-3-methyl-4-morpholinyl]pyrido[2,，3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxybenzenemethanol    AZD8055

（2Z） -2-Cyano-N-（2，5-dibromophenyl）-3-hydroxy-2-butenamide LFM-A13

D-（    Chloramphenicol

3,，5-Bis[（4-methylphenyl）methylene]-4-piperidone hydrochloride    DUB Inhibitor,， NSC-632839

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法Ethyl （3-methyl-6-（4-methyl-3-（methylsulfonamido）phenyl）-[1，2,，4]triazolo[4,，3-b]pyridazin-8-yl）carbamate    Bromosporine

β-Nicotinamide adenine dinucleotide， reduced form,， （Reduced Coenzyme-I） disodium salt,； β-DPNH， β-NADH,， DPNH    NADH,， disodium salt

T20 （PBS） Blocking Buffer EZBlock T20 （PBS） Blocking Buffer