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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸擴(kuò)增>>10次DNA Shuffling試劑盒

DNA Shuffling試劑盒

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  • 型號(hào) 10次
  • 品牌 R&D/美國(guó)
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2022-04-22 13:55:17瀏覽次數(shù):284

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 貨號(hào) GOY-F10259
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
DNA Shuffling試劑盒公司正*的各種產(chǎn)品組織基質(zhì)金屬(MMP-7)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
體液基質(zhì)金屬(MMP-7)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP-8)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
組織基質(zhì)金屬(MMP-8)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
體液基質(zhì)金屬(MMP-8)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號(hào)

DNA Shuffling試劑盒

DNA Shuffling   Kit

10

GOY-F10259

產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

DNA ShufflingDNA分子的體外同源重組,,它是一種分子水平上的定向進(jìn)化(directed   evolution)技術(shù),它以一個(gè)或多個(gè)基因?yàn)槠鹗疾牧?,通過(guò)先隨機(jī)斷裂成小片段,再進(jìn)行互為模板和引物的PCR(無(wú)外加引物),,后再進(jìn)行常規(guī)PCR(外加引物)等處理,,后得到含有大量DNA重組突變的PCR產(chǎn)物。

產(chǎn)品特點(diǎn):

1.即開(kāi)即用,,用戶只需要提供樣品DNA模板,,無(wú)需單獨(dú)準(zhǔn)備各成分。

2.操作手冊(cè)經(jīng)過(guò)優(yōu)化,,1-2天即可完成,,節(jié)省大量?jī)?yōu)化時(shí)間。

3.本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷,。

儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,,保存期限一年,。

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

實(shí)驗(yàn)步驟
(1)
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可,!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無(wú)水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(
在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅,。
b.
單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染,。
c
.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,,每5-10×106動(dòng)物、植物,、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解,。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理,。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),,脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,,多糖,,高分子量DNA,上清中含有RNA,。處理脂肪組織時(shí),,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作,。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘,。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘,。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層,。RNA主要在水相中,,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,,進(jìn)一步操作見(jiàn)后,。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,,室溫放置10分鐘,。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀,。移去上清。
人整合素連接激酶1elisa試劑盒   人整合素連接激酶1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人整合素連接激酶1試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人整合素連接激酶1試劑盒,、人整合素連接激酶1 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月,。     2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式:C5H6N2O2S 

人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒     2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名:2-氨基二苯砜  分子式:C12H11NO2S  度:98.0%   

人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit     2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名:2-氨基二苯硫醚  分子式:C12H11NS  度:98.0%   

人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)ELISA試劑盒     2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名:2-氨基二苯砜  分子式:C12H11NO2S 

人真胰島素(TI)ELISA試劑盒     2-Aminophenyl phenyl sulfide  中文名:2-氨基二苯硫醚  分子式:C12H11NS  度:98.0%
DL-
苦杏仁酸  DL-Mandelic acid  質(zhì)量規(guī)格:AR Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISA試劑盒人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

抗壞血酸;C  Ascorbic acid,;vitamin C  質(zhì)量規(guī)格:AR;>99% 植物可溶性酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(液泡)20

C(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ascorbic acid,;vitamin C  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 HumanVitaminDReceptor,VDRELISAKitD受體(VDR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺  Octadecanamine  質(zhì)量規(guī)格:AR 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 ,英文名: PTH ELISA Kit

山梨酸  Sorbic acid  質(zhì)量規(guī)格:AR,99% 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 96T/48T

盧立康唑  Luliconazole  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)試劑盒 Human PRF1/PFP ELISA Kit

5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基鄰菲啰啉  5-Nitro-1,10-phenanthroline  質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鐵冬青酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Rotundic acid  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品 INSULIN蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25

酚藍(lán)鈉  Bromophenol blue  salt  質(zhì)量規(guī)格:AR Peanagglinin,PNAELISA試劑盒花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

百里香酚蘭鈉  Thymol blue  salt  質(zhì)量規(guī)格:AR 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA 試劑盒
DNA Shuffling
試劑盒細(xì)胞磷酸腺苷脫氨酶(AMPD)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

血液蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

組織蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

通用型蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒


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