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供貨周期	現(xiàn)貨	貨號	GOY-F10243
應用領域	化工	主要用途	僅供科研使用

產(chǎn)品詳細介紹：

本試劑盒是整合cDNA第一鏈合成試劑（RT試劑盒）和即用型qPCR試劑而得的qRT-PCR試劑盒,。cDNA第一鏈合成反應和qPCR反應分別在兩個離心管中進行。

試劑盒特點：

1．即開即用,，足夠50次RT反應（10μL體系）和50次qPCR反應（20μL體系）,。

2．RT和PCR分開進行，方便優(yōu)化RT和qPCR條件,，也方便一個RT反應用于多個不同引物的qPCR擴增,。

3．RT mix中含除酶、模板和引物以外的RT成分,，簡化了反應設置步驟,。

4．qPCR mix是2×預配液，也簡化了反應設置步驟,。

5．qPCR mix含qPCR染料，無需另外加入相關熒光PCR染料,。

6．擴增效率高, 長可擴增5kbp以上的RNA,。

7．提供定量PCR專用模板稀釋液，保證在制作標準曲線時低濃度樣品的準確性,。

保存條件：-20℃保存, 有效期一年,。

自備試劑：樣品RNA,、PCR引物、ROX染料

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	貨號
兩步法RT-PCR熒光定量試劑盒	Two-Step qRT-PCR Kit	50次	GOY-F10243

DNA提取流程圖：

實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可,！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數(shù))
人轉化生長因子α(TGF-α)ELISAKit 2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名：2-甲基蒽醌分子式：C15H10O2 度：98.0% 關鍵詞：

人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 5751-20-2 中文名：分子式：C5H6N2OS

人主要組織相容性復合體Ⅱ類elisa試劑盒人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒規(guī)格型號：96T/48T 人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒,、人主要組織相容性復合體Ⅱ類 elisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 1975-51-5 中文名：分子式：C8H7NO4 度：98.0% 關鍵詞：

人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒 2-Methylanthraquinone 中文名：2-甲基蒽醌分子式：C15H10O2 度：98.0%

人主要組織相容性復合體Ⅰ類elisa試劑盒人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒規(guī)格型號：96T/48T 人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒,、人主要組織相容性復合體Ⅰ類 elisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質期：6個月,。 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 1975-51-5 中文名：分子式：C8H7NO4
固深紅 GBC Fast Garnet GBC Salt 質量規(guī)格：BS,90% Mouseβ-galactosidase,βGALELISA試劑盒小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

固紅 3 GL Fast Red 3 GL Salt 質量規(guī)格：BS 小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA 試劑盒

固紅 KL鹽 Fast Red KL Salt 質量規(guī)格：BS Rat granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒

固紅B Fast Red B Salt 質量規(guī)格：>90% Humanhistatin5ELISAKit 人富組蛋白(histatin5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

固紅-萘磺酸 TR Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt 質量規(guī)格：≥90%(TLC) Humanaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISA試劑盒人抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

麗春紅S Ponceau S 質量規(guī)格：BS 植物脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測試劑盒20

環(huán)丙貝特 Ciprofibrate 質量規(guī)格：>98%,BR HumanαLactalbumin，α-LaELISAKit人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

曙紅Y(水溶) Eosin Y water solution 質量規(guī)格：BS 小鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒 ,，英文名： CT ELISA Kit

偶氮胭脂紅B Azocarmine B 質量規(guī)格：IND 大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISAKit 96T/48T

偶氮胭脂紅G Azocarmine G 質量規(guī)格：BS 人雌三(E3)試劑盒 Human Esiol,E3 ELISA Kit
兩步法RT-PCR熒光定量試劑盒細胞對氧磷酶2（PON2）活性比色法定量檢測試劑盒

血液對氧磷酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量檢測試劑盒

組織對氧磷酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量檢測試劑盒

血液對氧磷酶1（PON1）芳酯酶活性比色法定量檢測試劑盒

組織對氧磷酶1（PON1）芳酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理,。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,，不取決于細胞數(shù),。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液離心收集細胞,，每5-10×106動物,、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,，反復吸打,。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理,。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘,，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質,，脂肪,，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘,，取上清,。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖,，高分子量DNA,，上清中含有RNA,。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除,。取澄清的勻漿液進行下一步操作,。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒,，室溫放置3分鐘,。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相,，上層為無色水相和一個中間層,。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅,。
7. 把水相轉移到新管中,，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后,。用異丙沉淀水相中的RNA,。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘,。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現(xiàn)膠狀沉淀,。移去上清,。