詳細(xì)介紹
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱:Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測,。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
Rabbit Anti-rat IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗大鼠IgM規(guī)格: 0.1ml
phospho-GADD153 (Ser30) 磷酸化GADD153抗體規(guī)格: 0.1ml
BEX4 腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml
SENP3 類泛素蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
G Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit anti-Pig IgG whole serum 兔抗豬IgG抗清規(guī)格: 1ml
ChRM2 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2抗體規(guī)格: 0.1ml
UGCGL2 二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
MYOZ/MYOZ1 MYOZ抗體規(guī)格: 0.2ml
MKKS/BBS6 巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-PRL(Ser163) 磷酸化泌素抗體規(guī)格: 0.1ml
Neprilysin 2 腦啡肽酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
ADCY6 苷酸環(huán)化酶6抗體 0.2ml
SH3TC2 脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體規(guī)格: 0.2ml
Unc18-3 突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-MAP4(Ser1073) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體規(guī)格: 0.1ml
MARCH10 膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml
G protein alpha Inhibitor 2 G蛋白α抑制蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗兔IgG規(guī)格: 0.1ml
TNFRSF19 瘤壞死因子配體超家族成員19抗體規(guī)格: 0.1ml
ARRDC1 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
雙孢蘑菇
小鼠結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:CT-26 WT
人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
棗椰球擬酵母 Torulopsis dattila
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
VCaP(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
JEG-3(人絨毛膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
尖孢鐮刀菌棉花?;?/span> Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
低分化胃英文名稱:MKN-45
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
杯形禿馬勃 Calvatia cyathiformis
小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
大腸桿菌 Escherichia coli
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
串珠菌 Leuconostoc lactis
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
MDA-MB-231(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:CRT