詳細介紹
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷,。
標本:血清,、血漿、細胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測,。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實驗誤差,,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液:標準品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時,。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
TE-10(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
猴菌
膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus
DU 145(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
大腸桿菌 Escherichia coli
eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒250ml25ml,、100ml,、250ml
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
天藍色鏈霉菌 Streptomyces coelicolor
草魚胚胎細胞英文名稱:CP-88
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
側(cè)耳 Pleurotus sp.
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:200次
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細胞
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)5×106cells/瓶×2 LIFR/CD118 白病抑制因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml
PIBF1/C13orf24 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 磷酸化雌激素受體α抗體規(guī)格: 0.1ml
DFFB DNA斷裂因子抗體(蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶)規(guī)格: 0.2ml
Nuclear Matrix Protein p84/NMP84 核基質(zhì)p84蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Matriptase 2 膜型絲氨酸蛋白酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
RARRES1/TIG1 視黃酸受體應(yīng)答蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
CD1a/Cortical thymocyte antigen CD1A T淋巴細胞CD1抗體規(guī)格: 0.1ml
WISP1 Wnt1信號通路蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-Dnmt1(Tyr969) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
DIS/CCAR1 細胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63瘤抑制基因抗體規(guī)格: 0.1ml
Cyclooxygenase 3/Cox3 前列素過氧化物合成酶3抗體規(guī)格: 0.2ml
PLC beta 3 磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格: 0.1ml
C5a 過敏毒素C5a(補體C5a)抗體規(guī)格: 0.2ml
MTSS1 瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1規(guī)格: 0.2ml
JAM1 連接粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-PRKD3(Ser41) 磷酸化蛋白激酶C nu型抗體規(guī)格: 0.1ml
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟 NF66/alpha Internexin α-中連蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Neurturin 神經(jīng)生因子抗體規(guī)格: 0.1ml
C20orf194 20號染色體開放閱讀框194抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy3 Cy3標記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml
phospho-APBB1 (Ser347) 磷酸化鐵蛋白Fe65抗體規(guī)格: 0.1ml
ENPP1 核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體規(guī)格: 0.2ml