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人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-08 17:46:33瀏覽次數(shù):395次

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人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,,全程免費(fèi)與指導(dǎo),,只需來樣即可為您免費(fèi)代測(cè),該試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit  
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬:人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè),。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔、待測(cè)樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,,再加入顯色劑 B 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個(gè)標(biāo)本),,如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

桿菌屬 Lactobacillus sp.

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

TE-10(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

猴菌

膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus

DU 145(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

大腸桿菌 Escherichia coli

eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒250ml25ml100ml,、250ml

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

天藍(lán)色鏈霉菌 Streptomyces coelicolor

草魚胚胎細(xì)胞英文名稱:CP-88

宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

側(cè)耳 Pleurotus sp.

細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒規(guī)格:200

EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞

煙曲霉 Aspergillus fumigatus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 LIFR/CD118  白病抑制因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml

PIBF1/C13orf24  孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-dog IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)  磷酸化雌激素受體α抗體規(guī)格: 0.1ml

DFFB  DNA斷裂因子抗體(蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶)規(guī)格: 0.2ml

Nuclear Matrix Protein p84/NMP84   核基質(zhì)p84蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Matriptase 2  膜型絲氨酸蛋白酶2抗體規(guī)格: 0.2ml

RARRES1/TIG1  視黃酸受體應(yīng)答蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

CD1a/Cortical thymocyte antigen CD1A  T淋巴細(xì)胞CD1抗體規(guī)格: 0.1ml

WISP1  Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-Dnmt1(Tyr969)  磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

DIS/CCAR1  細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-p63 (Ser160/Ser162)  磷酸化P63瘤抑制基因抗體規(guī)格: 0.1ml

Cyclooxygenase 3/Cox3  前列素過氧化物合成酶3抗體規(guī)格: 0.2ml

PLC beta 3  磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格: 0.1ml

C5a  過敏毒素C5a(補(bǔ)體C5a)抗體規(guī)格: 0.2ml

MTSS1  瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1規(guī)格: 0.2ml

JAM1  連接粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-PRKD3(Ser41)  磷酸化蛋白激酶C nu型抗體規(guī)格: 0.1ml

人一氧化氮(NO)elisa試劑盒操作步驟 NF66/alpha Internexin  α-中連蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Neurturin  神經(jīng)生因子抗體規(guī)格: 0.1ml

C20orf194  20號(hào)染色體開放閱讀框194抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml

phospho-APBB1 (Ser347)  磷酸化鐵蛋白Fe65抗體規(guī)格: 0.1ml

ENPP1  核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

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