人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)elisa試劑盒保存     英文名稱：Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,，特異性強,，重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。 
人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)elisa試劑盒保存一、標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融。 
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)elisa試劑盒保存二,、注意事項
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用,，試劑應視為傳染物,，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘,。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃,。不需及時實驗,，標本-20℃保存，避免反復凍融,。
6． 在反復清洗微孔板,，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度,，造成吸光度偏離的假像,。
7． 加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條,，以便使孔中的液體充分混勻,。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍,，有效期請見盒內(nèi)標示。

三,、實驗前準備
1．使用前應將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘。
2．準備各種實驗儀器及材料,，如微量移液器,，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,，充分混勻待用。）
人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)elisa試劑盒保存操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號,，每板應設陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此 重復 5 次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50µl,，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。

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