人雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,，特異性強,，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱：Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷,。
標本：血清,、血漿、細胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬：人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
人雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,，濾紙,。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）,。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
人雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2. 細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融,，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測,。
3. 血清：在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘，收集上 清,。
5. 體液：包括胸腹水,、腦脊液，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
6. 組織標本：切取組織標本,，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測,，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘,。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標準 品組（6 個濃度）,、空白孔、待測樣品組,。 注：為減少實驗誤差,，保證準確性，建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液：標準品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時,。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s,，充分清洗酶標板 5 次,，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液,。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時,，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,，從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,，如樣品濃度過高,，應(yīng)對樣品進行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標準曲線,，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商,， 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換,，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

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