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CCC-SMC-1 (兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2022-04-06 14:01:18瀏覽次數(shù):173

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0474 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
CCC-SMC-1 (兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體 乳鐵蛋白抗體
DNA聚合酶η抗體 乳酸脫氫酶抗體
DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體 乳酸脫氫酶D抗體
DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體 乳清蛋白α抗體
DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體 肉堿氧位甲基轉(zhuǎn)移酶抗體

詳細(xì)介紹

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1.
棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí),。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

圖片13.jpg

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

CCC-SMC-1 (兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0474

名稱    CCC-SMC-1 (兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)
組織來(lái)源 主動(dòng)脈

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 多角形

背景描述 CCC-SMC-1細(xì)胞是利用2月齡大耳白兔胸腹主動(dòng)脈,,去除內(nèi)皮,,剝離外膜,,進(jìn)行原代培養(yǎng)而來(lái)的細(xì)胞;經(jīng)a-SMA鑒定純度,連續(xù)培養(yǎng)可傳代15次以上,。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM15% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,,95%CO2,,5%

溫度:37

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng):
1
、無(wú)菌條件下,,取出1-3d SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
,、剩下的組織再加入34mL酶消化液,,混懸10s,置37消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5
,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2
PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min,;
3
,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4
,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5
,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37條件下放置1h,;
6
、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
發(fā)光假蜜環(huán)菌   蘇云金芽胞桿菌以色列亞種 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis

費(fèi)氏志賀氏菌(福氏志賀氏菌)   魯氏毛霉

黑曲霉菌CMCC98003凍干粉   側(cè)耳

斯氏油脂酵母   營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基200ml

沙門氏菌IV   裂殖壺菌
大鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠白介素28B(IL-28B)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠白介素28A(IL-28A)elisa檢測(cè)試劑盒
CCC-SMC-1 (
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠組織因子途徑抑制物(TFPIelisa檢測(cè)試劑盒

大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠組織因子與活化凝血因子7復(fù)合物elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)elisa檢測(cè)試劑盒

冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。


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