產品屬性：

名稱    大鼠三叉神經星形膠質細胞
2.組織來源：腦組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠三叉神經星形膠質細胞分離自三叉神經組織,；三叉神經為粗大的混合性腦神經，含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維,。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經運動核,，纖維組成三叉神經運動根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,，位于感覺根下內側,，后進入三叉神經第3支下頜神經中，經卵圓孔出顱,，隨下頜神經分支分布于咀嚼肌等,。運動根內還含有三叉神經中腦核有關的纖維，主要傳導咀嚼肌的本體感覺,。三叉神經內以軀體感覺神經纖維為主,，這些纖維的細胞體位于三叉神經節(jié)（半月節(jié)）內，該神經節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經壓跡處,，為硬腦膜形成的美克爾腔包裹,。神經膠質細胞是神經組織中除神經元以外的另一大類細胞,，也有突起，但無樹突和軸突之分,，廣泛分布于中樞和周圍神經系統(tǒng),。在哺乳類動物中，神經膠質細胞與神經元的細胞數(shù)量比例約為10：1,。在中樞神經系統(tǒng)（CNS）中的神經膠質細胞主要有星形膠質細胞,、少突膠質細胞（與前者合稱為大膠質細胞）和小膠質細胞等。傳統(tǒng)認為膠質細胞屬于結締組織,，其作用僅是連接和支持各種神經成分,，其實神經膠質還起著分配營養(yǎng)物質、參與修復和吞噬的作用,，在形態(tài),、化學特征和胚胎起源上都不同于普通結締組織。星形膠質前體細胞主要表達Vimentin,，而成熟之后表達Vimentin和膠質纖維酸性蛋白（GFAP）,，故GFAP被認為是星形膠質細胞成熟的標志物。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠三叉神經星形膠質細胞采用消化法結合差速貼壁法篩選制備而來,，細胞總量約為5×105cells/瓶,。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠三叉神經星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告：
產品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，后將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
銅綠假單胞菌凍干粉   巧克力微桿菌

藤黃微球菌   粘質沙雷氏菌粘質亞種  Lostproductivityofpigment

朝鮮芽孢八疊球菌   短乳桿菌

膠質芽孢桿菌   大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種

根霉屬的種   無花果曲霉
人II型膠原螺旋肽（HELIX-II）elisa檢測試劑盒

人II型前膠原羧基末端前肽（PIICP）elisa檢測試劑盒

人IV型膠原（IV－C）elisa檢測試劑盒

人IV型前膠原肽（PIVNP）elisa檢測試劑盒

人I型膠原（Col I）elisa檢測試劑盒
大鼠三叉神經星形膠質細胞小鼠表面活性物質關聯(lián)蛋白D(SPD)elisa檢測試劑盒

小鼠表皮生長因子(EGF)elisa分析檢測試劑盒

小鼠表皮生長因子(EGF)elisa檢測試劑盒

小鼠表皮生長因子（EGF）elisa檢測試劑盒

小鼠表皮生長因子受體(EGFR)elisa分析檢測試劑盒