培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

產品屬性：

名稱    小鼠骨髓造血干細胞
2.組織來源：骨髓組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠骨髓造血干細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌,、病毒等；某些淋巴細胞能抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多,，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞，終生成各種血細胞成分,，包括紅細胞,，白細胞和血小板,。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分。同時在損傷,、炎癥等應激狀態(tài)下,，造血干細胞也扮演著調節(jié)和維持體內血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,，造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,，在其它實體瘤的治療中，比如淋巴瘤,，生殖細胞瘤，乳腺癌,，小細胞肺癌，主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨髓造血干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心,、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠骨髓造血干細胞經(jīng)CD34,、Sca-1免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態(tài) 圓形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

實驗報告：
產品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
土壤腐殖酸清除劑100mL  預混型丙 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g

一步離心式石蠟清除劑100 次  預混型丙 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g

菌體內毒素清除劑200mL  魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次

紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL  熒光尺1個

紅細胞裂解液 B 型 ( 流式細胞分析用 ) 100mL  銀染清除劑30 次
人Survivinelisa檢測試劑盒

人s可溶性CD105 sCD105elisa檢測試劑盒

人s可溶性CD14 sCD14elisa檢測試劑盒

人Tau-181蛋白（TAU-181）elisa檢測試劑盒

人Tau-231蛋白（TAU-231）elisa檢測試劑盒
小鼠骨髓造血干細胞小鼠促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)elisa檢測試劑盒

小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)elisa分析檢測試劑盒

小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)elisa檢測試劑盒

小鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa檢測試劑盒

小鼠釋放激素(GnRH)elisa分析檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。