詳細介紹
大額牛腎細胞,;BFR-K1價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染。 細胞到達客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
大額牛腎細胞,;BFR-K1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性新生大額牛的腎組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立,。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
大鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
沙氏BHI瓊脂/沙氏腦心浸液瓊脂/Sabouraud BHI Agar 真菌檢測 國產(chǎn)/進口 250克
TSCCa(人舌鱗細胞) 5×106cells/瓶×2
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
CCDA基礎(chǔ)/彎曲桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)/炭孢哌酮脫氧膽酸鹽瓊脂基礎(chǔ)/CCDA Base 彎曲桿菌的分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2
敘利亞倉鼠腎細胞 英文名稱: BHK
碳酸氫鈉瓊脂基礎(chǔ) 炭疽桿菌的莢膜培養(yǎng) 國產(chǎn)/進口 250克
TBST 500ml 國產(chǎn)
SK-N-MC(人神經(jīng)上瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
PVDF膜(0.45um) 26.5cm × 3.75m,12cm x 20cm gersion 12cm x 20cm
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞) 5×106cells/瓶×2
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞 gersion
PC-3(人前列腺細胞) 5×106cells/瓶×2
Hut-102(人膚T淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Caco-2(人結(jié)直腸腺細胞) 5×106cells/瓶×2
EL4(小鼠淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠腎動脈內(nèi)細胞*培養(yǎng)基 100mL 20 次 一站式 GST 標記蛋白質(zhì)微量純化套裝
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 ) 23-0510-10 10g
柱式醬油 DNAout 130956-10 10 次
10mL RNA 洗脫液
100 次 草桿 PCR Mix 4
1g 硫酸新干粉
50mL 即用型封堵液 (Nylon )
Caspase 6 檢測試劑盒 140641-50 50 次
DNA 洗脫液 70705-50 50mL
20 次 Southern Marker DL2000( 生物素 )
10mg DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )
10 次 預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標準 (14.4-97.4KD)
1mL Tuner(DE3)plysS 種
3'-RACE 試劑盒 101104-10 10 次
超快非醇核酸沉淀劑 60402-30 30 次
25 次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC·PI)
100mL 大腸桿零誘導(dǎo)培養(yǎng)基
10mL TE 緩沖液,,PH7.0
1mL 酵母蛋白酶抑制劑