詳細介紹
盤羊皮膚細胞;OAM-S1價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產品全部經過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內,,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
盤羊皮膚細胞,;OAM-S1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性盤羊的皮膚組織。1996年由中國科學院昆明細胞庫建立,。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
傳代方法 1:2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現用現配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
堿性藍G 分子式: 分子量: 英文名稱: Alkaline blue G CAS號:
熒光桃紅B 分子式: 829.63 分子量: C20H2Br4Cl4Na2O5 英文名稱: Phloxine B CAS號: 18472-87-2
氯磷酸二異丙酯 分子式: 200.6 分子量: C6H14ClO3P 英文名稱: Two isopropyl chloride phosphate CAS號: 2574-25-6
仲丁基溴化鎂 分子式: 161.32 分子量: C4H9BrMg 英文名稱: Zhong Dingji bromide CAS號: 922-66-7
靛蘭胭脂紅 分子式: 分子量: 英文名稱: Indigo carmine CAS號:
變色酸 分子式: 320.3 分子量: C10H8O8S2 英文名稱: Discoloration acid CAS號: 148-25-4
酸性 S-RL 分子式: 分子量: 英文名稱: Acid black S-RL CAS號:
3-羥基-2,4,6-三碘苯甲酸(HTBA) 分子式: 515.81 分子量: C7H3I3O3 英文名稱: 3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA) CAS號: 53279-72-4
氯代正丁烷 分子式: 92.57 分子量: C4H9Cl 英文名稱: Chlorinated butyl CAS號: 109-69-3植物種屬鑒定 PCR Mix 2 131129B-100 100 次
10×100μL XL2-Blue 感受態(tài)細胞
5mL 肝素瓊脂糖
10g N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸
10 次 柱式血液 mtDNAout,,測序
結晶紫 CAS548-62-9 25g
C43(DE3) 種 12-228 1mL
100 次 血液保存和 DNA 純化套裝
48 T 紅細胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測試盒
5g 蘇丹 B
10 次 糖蛋白染色試劑盒
L- 谷氨酰胺 CAS56-85-9 25g
MAL 指示劑培養(yǎng)基 130898-100 100mL
25g 胰蛋白酶 1:250
100mg 膠原酶Ⅰ型
1g 溴甲酚綠
0.1mg 山羊抗兔 IgG,,熒光素 555 標記
氯化硝基四氮唑蘭 CAS298-83-9 500mg
小鼠抗 GFP 標簽單抗 130580-1000 1000μL
5次 植物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )
25g L- 精氨
25g QAE 葡聚糖凝膠 A-50
20 μg 哺乳動物雙雜交試劑盒