詳細(xì)介紹
幼兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞*直銷(xiāo)操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
幼兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞*直銷(xiāo)現(xiàn)貨直銷(xiāo),,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,,細(xì)胞系,,種類(lèi)齊全,現(xiàn)貨,,質(zhì)量保證,,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū),。
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 成纖維樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一出生三天的幼兔的正常骨髓組織。2014年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶 無(wú)
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),,若干冰已經(jīng)*融化,,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研,。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,,周三,,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞,。到達(dá)客戶(hù)手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,,支持客戶(hù)檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款,。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),,用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,,并且?guī)椭蛻?hù)更多的了解細(xì)胞特性。
次甲基綠 分子式: 433 分子量: C16H17ClN4O2S · 0. 英文名稱(chēng): Methylene green CAS號(hào): 224967-52-6
均*苯磺酸鈉 分子式: 222.24 分子量: C9H11NaO3S 英文名稱(chēng): Three sodium toluene sulfonic acid CAS號(hào): 6148-75-0
4-溴化鎂 分子式: 215.759 分子量: C6H4BrClMg 英文名稱(chēng): 4- chloride and magnesium bromide CAS號(hào): 873-77-8
愈創(chuàng)木酚 分子式: 124.13 分子量: C7H8O2 英文名稱(chēng): Guaiacol CAS號(hào): 1990/5/1
橙黃I 分子式: 350.32 分子量: C16H11N2NaO4S 英文名稱(chēng): Orange I CAS號(hào): 523-44-4
2,2',5,5'-四氯二苯胺 分子式: 322.02 分子量: C12H8Cl4N2 英文名稱(chēng): 2,2', 5,5'- four two aniline CAS號(hào): 15721-02-5
1,8-二氮-9-芴酮(DFO) 分子式: 182.18 分子量: C11H6N2O 英文名稱(chēng): 1,8- two n -9- fluorenone (DFO) CAS號(hào): 54078-29-4
異戊烷 分子式: 72.15 分子量: C5H12 英文名稱(chēng): I-Pentane CAS號(hào): 78-78-4
二乙二醇乙 分子式: 134.18 分子量: C6H14O3 英文名稱(chēng): Diethylene glycol ethyl ether CAS號(hào): 111-90-0
萘 分子式: 128.17 分子量: C10H8 英文名稱(chēng): Naphthalene CAS號(hào): 91-20-3
乙氧嘧磺隆 分子式: 398.39 分子量: C15H18N4O7S 英文名稱(chēng): Ethoxy sulfometuronmethyl CAS號(hào): 126801-58-9
乙氧基喹啉 分子式: 217.31 分子量: C14H19NO 英文名稱(chēng): Oxygen radical CAS號(hào): 91-53-2
甲基強(qiáng)的松龍 分子式: 374.47 分子量: C22H30O5 英文名稱(chēng): Methylprednisolone CAS號(hào): 83-43-2 5次 DAB 法地高雜交試劑盒
25 次 一站式動(dòng)物 mRNAout
200U Therminator DNA 聚合酶
水解乳蛋白 CAS68458-87-7 100g
Y1089 種 12-262 1mL
30 次 一管式 DNA 膠回收試劑盒
25g 抗壞血酸
100mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷
1mL 地塞米松溶液 ,50mg/mL
多聚半乳糖醛 CAS9049-37-0 1g
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 2 130525-1 1mL
250 次 柱式動(dòng)物 RNAout
50g 酪蛋白
20Ku 脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )
50 mL 親和層析柱
三氯 CAS76-03-9 100g
pNPP 干粉 131116-1 1g
30μL β-Actin 小鼠單抗
500mL MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
5g 1- 萘胺