詳細(xì)介紹
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,;SMC價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞來(lái)源于兔主動(dòng)脈,常用作動(dòng)脈粥樣硬化的研究,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,;3~4天1次。
傳代情況 P10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 40~44
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
穿心蓮內(nèi)酯 分子式: 350.4492 分子量: C20H30O5 英文名稱: Andrographolide CAS號(hào): 5508-58-7
酸性橙74 分子式: 441.35 分子量: C16H12N5NaO7S 英文名稱: Acid orange 74 CAS號(hào): 10127-27-2
酸性媒介橙R 分子式: 分子量: 英文名稱: Acid medium orange R CAS號(hào): VDDSV
酸性藍(lán)BGA 分子式: 分子量: 英文名稱: Acid blue BGA CAS號(hào):
次甲基藍(lán) 分子式: 373.9 分子量: C16H18ClN3S·3H2O 英文名稱: Methylene blue CAS號(hào): 7220-79-3
異丁酸納 分子式: 分子量: 英文名稱: ISO butyrate CAS號(hào): 996-30-5
3-苯甲基-5-(2-羥基乙基)-4-甲基噻唑啉氯 分子式: 269.79 分子量: C13H16ClNOS 英文名稱: 3- -5- (2- hydroxy ethyl benzene methyl) -4- methyl thiazole chloride CAS號(hào): 4568-71-2
磷鉬酸 分子式: 1861.43(無(wú)水計(jì)) 分子量: H7〔P(Mo2O7)6〕·XH2O 英文名稱: Phosphomolybdic acid CAS號(hào): 51429-74-4
芐橙 分子式: 801.78 分子量: C35H25N5Na2O9S3 英文名稱: Benzyl orange CAS號(hào): 2429-80-3
5KU β- 半乳糖苷酶
50 T 丙二醛測(cè)試盒 / 脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試盒
膠原酶Ⅳ型 CAS9001-12-1 100mg
兔抗雞 IgY,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 131152-300 300μL
柱式軟骨 RNAout 101121-50 50 次
1g n- 基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
1個(gè) 4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)
5mL 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 -2
1.5mL DNA 尿素 -PAGE 上樣液
少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 21-0340-5 5mL
RNA Guanidium HCl ( 鹽酸胍 ) 101224-100 100g
1mg PMA/TPA (PKC 激活劑 )
1mL BJ5183 種
5mg L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )
500 次 MTT 檢測(cè)試劑盒
LY294002(PI3K 抑制劑 ) 23-0460-1 1mg
一管式植物 DNAout 60705-500 500 次
100g RNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
12x50nm Cyanine 3-NHS Ester
50 次 加 T 試劑盒
1個(gè) 15mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)
Hoechst33342 干粉 130865-10 10mg