詳細(xì)介紹
中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
菝葜皂苷元 分子式: 416.64 分子量: C27H44O3 英文名稱: Sarsasapogenin CAS號: 126-19-2
炔諾肟酯 分子式: 369.5 分子量: C23H31NO3 英文名稱: Acetylene and the CAS號: 35189-28-7
西布 分子式: 473.58 分子量: C28H27NO4S 英文名稱: Sibutramine CAS號: 106650-56-0
甲基橙皮甙 分子式: 624.59 分子量: C29H36O15 英文名稱: Methylhesperidin CAS號: 11013-97-1
穗花杉雙黃酮 分子式: 538.46 分子量: C30H18O10 英文名稱: Amentoflavone CAS號: 1617-53-4
隱丹參酮 分子式: 296.3603 分子量: C19H20O3 英文名稱: Implicit Salvia CAS號: 35825-57-1
脫水穿心蓮內(nèi)酯 分子式: 332.43392 分子量: C20H28O4 英文名稱: Dehydroandrographolide CAS號: 134418-28-3
羥基積雪草苷 分子式: 975.12092 分子量: C48H78O20 英文名稱: Hydroxy group CAS號: 34540-22-2
氯化木蘭花堿 分子式: 377.86186 分子量: C20H24ClNO4 英文名稱: Chlorinated Magnolia CAS號: 100mg 細(xì)胞色素 C
5mL 成纖維細(xì)胞生長因子 - 不含動物成分
100g DNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 555·7-AAD) 140629-20 20 次
Southern Marker DL2000( 生物素 ) 120654C-20 20 次
50 次 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒
5mL 動物上皮細(xì)胞生長因子
25g DEAE 葡聚糖凝膠 A-25
5mg 彈性蛋白酶
離析酶 R-10 CAS9032-75-1 1g
亮抑蛋白酶肽溶液,10 mg/mL 100836-1 1mL
1.5mL 柱式內(nèi)毒素清除劑
500 次 MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒
50 T ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜需高速離心 )
200 次 一管式病毒 DNAout
1mL Rosetta(DE3) 種
ATP 硫酸化酶 130660-10 10U
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq) 130921-50 50 次
250mL Western 印跡膜洗膜液
100 T 過氧化氫酶測試盒 ( 可見光比色法 )
250g 蔗糖
250 mL 乙醇 - 甲醛固定液
吐溫 -80 CAS9005-65-6 100mL
HAT 篩選培養(yǎng)基 19-0090-500 500mL