人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株；7WML6.0說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株；7WML6.0說明書
形態(tài)特性  多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  將突變型PS1（M146L）基因轉(zhuǎn)染至表達(dá)APP基因的CHO細(xì)胞所得,，該細(xì)胞分泌的Aβ是野生型PS-1或APP轉(zhuǎn)染細(xì)胞的5~6倍,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；250ug/ml G418+2.5ug/ml puromycin
傳代方法  1:3傳代,；2~3天1次,。
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  
使用權(quán)限 A類

人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株；7WML6.0說明書細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株；7WML6.0說明書質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,；7WML6.0說明書操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

WHB-M1-W    WHB 口罩    白色口罩(三層帶過濾紙)    無紡布    50個(gè)/包,2000只/箱    詢價(jià) 元
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點(diǎn)擊    人膽道癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒    人膽道癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒    試劑盒    試劑盒    元印跡膜抗體稀釋液    81208-100    100mL
30μg    φX174RF Ⅱ DNA    
40 次    miRNA PAGE 膠回收試劑盒    
1000 支    10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯長尖 )    
24 T    總抗氧化能力測試盒 ( 比色法 )    
1mL    胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液,，20mg/mL    
Zenker 固定液    131223-250    250 mL
固相 RNase 清除劑    3090-100    100mL
100g    牛膽粉    
1600 次    AFLP 試劑盒 (EcoRI-MseI)    
1mg    MM4-64(FM®4-64)    
1套    玻璃勻漿器 ,1mL    
NAO     22-0510-25    25mg
動(dòng)物 DNAout    3670-100    100mL
3 mL    親和層析柱    
1套    玻璃勻漿器 ,5mL    
1.5mL    液相 RNase 清除劑    
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,；7WML6.0說明書20 次    即用型藍(lán)白 T 載體 C 型 (T7-T3，無 MCS)    
小鼠胰島細(xì)胞分離液 1.072    120911-200    200mL
柱式質(zhì)粒 DNAout    60205-50    50 次
100μg    人基因組 DNA 混合液    
10g    D- 阿拉伯糖    
50 次    柱式細(xì) DNAout