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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>>大鼠源細胞>> 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,;7WPS1圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-23 13:41:36瀏覽次數(shù):343次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆),;DUKXB11 carrying pDE
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WPS1圖片現(xiàn)貨直銷,,免費快遞送貨上門,。公司供應各種細胞株,細胞系,,種類齊全,,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書,。
產(chǎn)品名稱 | 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,;7WPS1圖片 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將野生型PS1基因轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達APP基因的CHO細胞,該細胞既表達PS-1,,同時也分泌Aβ,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418+2.5ug/ml puromycin
傳代方法 1:3傳代,;2~3天1次,。
傳代情況 C2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,,若干冰已經(jīng)*融化,,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請立即將細胞放入液氮中保存待用,,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研,。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,,周三,,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞,。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,,支持客戶檢測對應的biomarker,,(如證明細胞錯誤,全額退款,。)公司針對每株細胞,,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),,用于證明細胞的真實性,,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,,待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍,。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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