大鼠皮膚成纖維樣細胞,；RS1說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 大鼠皮膚成纖維樣細胞,；RS1說明書
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一大鼠的皮膚組織,。2007年由中國科學院昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%FBS
傳代方法  1：2傳代,；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產品全部經過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內,，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。   細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內,，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

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WHB-CCF175-1-GC    培養(yǎng)瓶    明膠包被175cm2培養(yǎng)瓶    600ml透氣蓋滅菌    5個/包,50個/盒    詢價 元地塞米松溶液 ,50mg/mL    131234-1    1mL
5g    #NAME?    
100mL    酵母及產孢培養(yǎng)基    
150mL    丙烯葡聚糖凝膠 S-400 HR    
1mL    分子生物學糖原溶液，10mg/mL    
苔素    CAS504-15-4    5g
肝素瓊脂糖    130413-5    5mL
30 次    植物總蛋白質微量提取試劑 (2DE)     
25g    L- 異亮氨酸    
250g    α- 淀粉酶    
100 μL    兔抗山羊 IgG(H+L),，辣根過氧化物酶標記    
原釩酸,，十二水    CAS13721-39-6    25g
Tricine-SDS-PAGE 上樣液    81213-5    5mL
100 次    總 SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )    
1000U    綠豆核酸酶    
100mL    曲拉通 X-114    
48 T    膽堿酯酶測試盒    
胃粘膜素    CAS84082-64-4    100mg
山羊抗小鼠 IgG，藻紅蛋白標記    131161-0.1    0.1mg
柱式植物 RNAout    71203-50    50 次
25mg    NAO     
100mg    5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)    
5mL    星形膠質細胞生長因子    
10mL    電泳溴酚藍溶液    
支氣道上皮細胞生長因子    21-0430-5    5mL