大鼠骨髓瘤細(xì)胞,；Y3-Ag 1.2.3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱 大鼠骨髓瘤細(xì)胞,；Y3-Ag 1.2.3圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  這是C. Milstein建立的骨髓瘤細(xì)胞株S210的衍生株。 未經(jīng)C. Milstein同意不得銷售或提供給第三方,。 這株細(xì)胞具8-氮鳥嘌呤抗性,，HAT敏感，可與大鼠B細(xì)胞融合大鼠-大鼠雜交瘤,。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  維持細(xì)胞濃度在1×105~2×106cells/ml。
傳代情況 PN5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

小鼠一氧化氮合成酶試劑盒規(guī)格型號：96T/48T小鼠一氧化氮合成酶試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠一氧化氮合成酶試劑盒、小鼠一氧化氮合成酶eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
小鼠磷脂酶試劑盒規(guī)格型號：96T/48T小鼠磷脂酶試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠磷脂酶試劑盒,、小鼠磷脂酶eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒,、大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
大鼠免疫球G試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠免疫球G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：大鼠免疫球G試劑盒、大鼠免疫球Geisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
大鼠可溶性核κB受體活化配基試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠可溶性核κB受體活化配基試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：大鼠可溶性核κB受體活化配基試劑盒,、大鼠可溶性核κB受體活化配基eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生1β試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生1β試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生1β試劑盒,、大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生1βeisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。5g    剛果紅    
250 mL    戊二醛磷酸緩沖固定液    
衣    CAS11089-65-9    5mg
F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )    19-0070-500    500mL
磁珠血液 DNAout    130509-50    50 次
100g    瓊脂粉    
250g    D- 無水葡萄糖    
5次    大提柱式植物 RNAout    
50mL    內(nèi)毒素清除親和介質(zhì)    
人類單鏈選擇性單功能尿嘧啶 -DNA 糖基化酶    130649-500    500U
柱式探針純化試劑盒    121122-10    10 次
5mL    TCEP 溶液,，0.5M    
50μL    電泳 SYBR Green I    
100g    Tricine 干粉,，電泳     
150 次    DNA 修復(fù)混合液     
R- 藻紅蛋白標(biāo)記親和素    131089-1    1mg
即用型高保真 PCR 試劑盒    90708-9    9mL
10g    脫氧膽酸    
100mg    放線酮    
25mL    四甲基乙二胺    
2000U    T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q)    
抑肽酶    CAS9087-70-1    2mg
即用型藍(lán)白 T 載體 D 型 ( 無啟動子，有 MCS)    120514-20    20 次
250U    苷脫氨酶    
5g    固藍(lán) BB 鹽    
5g    固綠