大鼠肝細胞瘤；H-4-II-E圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細胞名稱 大鼠肝細胞瘤；H-4-II-E圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  可誘導產(chǎn)生芳烴羥化酶,，用于檢測環(huán)境樣品或食物提取物中皮克級的多氯聯(lián)苯有機化合物,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C147
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

兔子Ⅰ型前膠原羧基端試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子Ⅰ型前膠原羧基端試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子Ⅰ型前膠原羧基端試劑盒、兔子Ⅰ型前膠原羧基端elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
兔子神經(jīng)營養(yǎng)3試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子神經(jīng)營養(yǎng)3試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子神經(jīng)營養(yǎng)3試劑盒,、兔子神經(jīng)營養(yǎng)3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
兔子膠原酶I試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子膠原酶I試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子膠原酶I試劑盒,、兔子膠原酶I elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
兔胎盤生長試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔胎盤生長試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔胎盤生長試劑盒,、兔胎盤生長elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
15ku    半纖維素酶    
0.1mg    Staurosporine(PKC 抑制劑 )    
500U    堿性磷酸酶，牛小腸    
Tocopherol( 抗氧化劑 )    23-0780-2    2g
大提柱式細菌 DNAout( 含溶菌酶 )    80927B-4    4次
10mL    RNase-free 水    
25 T    超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+Mg2+ATPase)    
50mL    通用洗柱液    
250 次    柱式凍存血液 DNAout    
超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+ATPase)    18-0150-25    25 T
DNA  Guanidine HCl( 鹽酸胍 )    101212-100    100g
100U    Sulfolobus DNA 聚合酶 IV    
50 次    DNA 電泳分子量標準 (250-1500 bp)    
50 次    柱式動物 RNAout    
1mL    SG1117 菌種    
Red-Tth DNA 聚合酶    130836-250    250U
柱式 DNA 膠回收試劑盒    60202-100    100 次
10g    酸洗玻璃珠系列    
4次    大提柱式植物 DNAout    
1mL    SDS-PAGE 上樣液,，5×    
30μL    α-Actin 小鼠單抗    
核酸內(nèi)切酶 IV    130638-1000    1000U
PCR 優(yōu)化試劑盒    100844-1    1套人周期依賴性激酶4試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人周期依賴性激酶4試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人周期依賴性激酶4試劑盒,、人周期依賴性激酶4 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
人脂a試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人脂a試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人脂a試劑盒、人脂a elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
人異質(zhì)型核核復合物試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人異質(zhì)型核核復合物試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人異質(zhì)型核核復合物試劑盒,、人異質(zhì)型核核復合物elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。