大鼠肝癌細胞,；RH-35圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細胞名稱 大鼠肝癌細胞；RH-35圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  RH-35細胞株源自由N-2feuorenyldiuctamid在雄性AxC大鼠中誘導(dǎo)的可移植Reulier H-35肝癌,。 細胞較小,，提供者稱饑餓24小時可以使其同步。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  胎牛血清,，10%
傳代方法  消化3-5分鐘,。1:2。3天內(nèi)可長滿,。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理：
1,、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

人細胞纖維連接試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人細胞纖維連接試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人細胞纖維連接試劑盒,、人細胞纖維連接elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
小鼠高鐵血紅試劑盒規(guī)格型號：96T/48T小鼠高鐵血紅試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠高鐵血紅試劑盒,、小鼠高鐵血紅elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
兔子內(nèi)皮1試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子內(nèi)皮1試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子內(nèi)皮1試劑盒,、兔子內(nèi)皮1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
豬基質(zhì)金屬酶抑制1試劑盒規(guī)格型號：96T/48T豬基質(zhì)金屬酶抑制1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：豬基質(zhì)金屬酶抑制1試劑盒、豬基質(zhì)金屬酶抑制1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。
豬葡萄轉(zhuǎn)運2試劑盒規(guī)格型號：96T/48T豬葡萄轉(zhuǎn)運2試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：豬葡萄轉(zhuǎn)運2試劑盒,、豬葡萄轉(zhuǎn)運2 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月,。1mL    牛血清白蛋白標準品，2mg/mL    
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二    CAS150399-99-8    1g
菌種保存液    100827B-10    10 管
10g    伊紅 Y, 醇溶性    
100mL    交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B    
1g    2,6- 二氯酚靛酚    
0.1mg    山羊抗小鼠 IgG,，熒光素 555 標記    
氨基 10B    CAS1064-48-8    5g
小鼠抗 V5 標簽單抗    130578-1000    1000μL
250 次    植物 RNAout    
1g    L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )    
500g    酵母浸膏    
0.1 mL×10    OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細胞    
葡聚糖凝膠 G-25 中顆粒    CAS9041-35-4    25g
免疫蛋白清除劑    130882-20    20 次
50 次    柱式真菌 DNAout    
5g    硫酸鏈    
250U    天門冬酰胺酶    
1500U    XbaI    
天門冬酰胺酶    CAS9015-68-3    250U
COX IV 小鼠單抗    140594-1000    1000 μL
動物 RNAout(TRIzol)     3070-100    100mL
兔子內(nèi)皮抑試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子內(nèi)皮抑試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子內(nèi)皮抑試劑盒,、兔子內(nèi)皮抑elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。