詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;c7b8H4價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8H4價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人第八相關(guān)抗原試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人第八相關(guān)抗原試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人第八相關(guān)抗原試劑盒,、人第八相關(guān)抗原elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人二磷腺苷試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人二磷腺苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人二磷腺苷試劑盒、人二磷腺苷elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人促腎上腺皮質(zhì)激釋放試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人促腎上腺皮質(zhì)激釋放試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人促腎上腺皮質(zhì)激釋放試劑盒,、人促腎上腺皮質(zhì)激釋放elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人補(bǔ)體片段3c試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人補(bǔ)體片段3c試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人補(bǔ)體片段3c試劑盒,、人補(bǔ)體片段3celisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人肺部活化調(diào)節(jié)趨化試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人肺部活化調(diào)節(jié)趨化試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人肺部活化調(diào)節(jié)趨化試劑盒、人肺部活化調(diào)節(jié)趨化elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人白細(xì)胞免疫球樣受體亞家族B成員4試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人白細(xì)胞免疫球樣受體亞家族B成員4試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人白細(xì)胞免疫球樣受體亞家族B成員4試劑盒,、人白細(xì)胞免疫球樣受體亞家族B成員4elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。BI 高通量 DNA 測(cè)序 D009-1 1次
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 91106A-50 50 次
10g 維生素 B1
20 次 克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液
10mL 弗氏*佐劑
5mL 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子
100g DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD) 140631-20 20 次
Southern Marker Oligo( 生物素 ) 120654E-20 20 次
10mL 石蠟油,,PCR
25 次 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒
1g 羥基脲
25mg 嗜熱菌蛋白酶
硫酸鎂七水 CAS10034-99-8 100g
胃蛋白酶抑制劑溶液,,1 mg/mL 100835-1 1mL
50 次 柱式凝固血液 DNAout
100g 馬來(lái)酸
1mL ATP 溶液,1mM
10mL DNA 上樣液 ( 紅 ),6×
1mL JM83 菌種
T4 DNA 連接酶 60609-200 200U
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq) 91202-50 50 次
0.5mg Wortmannin(PI3K 抑制劑 )