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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>> 小鼠雜交瘤細胞,;2G9B9H6A2圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-23 13:46:19瀏覽次數(shù):355次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)小鼠雜交瘤細胞,;2G9B9H6A2圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞,;2G9B9H6A2圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C30
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,,100%保證5代以內,,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染。 細胞到達客戶手中,,1個月內出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
大鼠腎試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠腎試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠腎試劑盒、大鼠腎eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠血栓調節(jié)試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠血栓調節(jié)試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠血栓調節(jié)試劑盒,、大鼠血栓調節(jié)eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
大鼠島自身抗體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠島自身抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠島自身抗體試劑盒、大鼠島自身抗體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
大鼠轉化生長β2試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠轉化生長β2試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠轉化生長β2試劑盒,、大鼠轉化生長β2eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠受體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠受體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠受體試劑盒,、大鼠受體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人β21抗體IgM試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人β21抗體IgM試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人β21抗體IgM試劑盒,、人β21抗體IgMelisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人腎上腺皮質抗體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人腎上腺皮質抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人腎上腺皮質抗體試劑盒、人腎上腺皮質抗體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人絲氨酶試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人絲100g DNA CTAB( 十六烷基*基溴化銨 )
100g RNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )
1mL AG1 菌種
Bst DNA 聚合酶,,大片段 800U 100209-800
電泳尿素 100g 100873-100
50 次 T3 體外轉錄試劑盒
250g 蛋白胨
30 次 植物總蛋白質微量提取試劑盒 (SDS-PAGE)
1000μL 小鼠抗 HA 標簽單抗
胰凝乳蛋白酶,測序 25μg 131025-25
dUTP 溶液,,100mM 0.4mL 131038-0.4
100g 甜菜堿鹽
25g 蒽酮
50 次 SP6 體外轉錄試劑盒
15mL 蘇木素染色液
苷 5g CAS58-61-7
植物種屬鑒定 PCR Mix 7 100 次 131129G-100
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