詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;2H7圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;2H7圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
人皮質酮試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人皮質酮試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人皮質酮試劑盒,、人皮質酮elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人鳥苷交換試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人鳥苷交換試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人鳥苷交換試劑盒,、人鳥苷交換試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人免疫球G1試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人免疫球G1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人免疫球G1試劑盒,、人免疫球G1 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人磷狀癌細胞抗體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人磷狀癌細胞抗體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人磷狀癌細胞抗體試劑盒,、人磷狀癌細胞抗體試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒試劑盒、人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1試劑盒,、人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人抗島受體抗體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人抗島受體抗體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人抗島受體抗體試劑盒,、人抗島受體抗體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人抗凝血酶受體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人抗凝血酶受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人抗凝血酶受體試劑盒、人抗凝血酶受體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。溴甲酚紫 5g CAS115-40-2
Y187 酵母菌種 1mL 12-193
20 次 一站式 GST 標記蛋白質微量純化套裝
10 次 克必隆 eTS RNA 熒光探針制備試劑盒
500mg 糖原Ⅲ型
100mL PRMI1640 培養(yǎng)基
100mL DNA Tris HCl,,1M,pH9.0
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE·7-AAD) 50 次 140624-50
DNA 電泳分子量標準 (3)pBR322/BstN I 50 次 90602G-50
25g 十二烷基肌氨酸
1.7mL×10 支 動態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量試劑盒
10g 吲哚
1mg 鏈霉親和素
氯化鋰 ( 無水 ) 100g CAS7447-41-8
二氯異香豆素溶液,,10mg/mL 5mL 130540-5
50 次 柱式酵母質粒 DNAout
5mL MnCl2溶液,,25mM,PCR
10mg apo- 轉鐵蛋白
100mL 動物 DNAout
5mL CCK-8 細胞增殖及毒性檢測試劑盒
堿性磷酸酶,,牛小腸 500U 120404-500
Oligo dT12-18 引物,,0.5μg/μL 5μg 100814-5
500mL Western 封堵液