小鼠雜交瘤細(xì)胞；2H7圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；2H7圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  可產(chǎn)生單克隆抗體 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

人皮質(zhì)酮試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人皮質(zhì)酮試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人皮質(zhì)酮試劑盒,、人皮質(zhì)酮elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人鳥苷交換試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人鳥苷交換試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人鳥苷交換試劑盒、人鳥苷交換試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人免疫球G1試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人免疫球G1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人免疫球G1試劑盒,、人免疫球G1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人磷狀癌細(xì)胞抗體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人磷狀癌細(xì)胞抗體試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人磷狀癌細(xì)胞抗體試劑盒,、人磷狀癌細(xì)胞抗體試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒試劑盒,、人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1試劑盒,、人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人抗島受體抗體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人抗島受體抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人抗島受體抗體試劑盒、人抗島受體抗體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人抗凝血酶受體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人抗凝血酶受體試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人抗凝血酶受體試劑盒,、人抗凝血酶受體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。溴甲酚紫    5g    CAS115-40-2
Y187 酵母菌種    1mL    12-193
20 次        一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
10 次        克必隆 eTS RNA 熒光探針制備試劑盒
500mg        糖原Ⅲ型
100mL        PRMI1640 培養(yǎng)基
100mL        DNA  Tris HCl,，1M，pH9.0
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-PE·7-AAD）     50 次    140624-50
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/BstN I    50 次    90602G-50
25g        十二烷基肌氨酸
1.7mL×10 支        動(dòng)態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量試劑盒
10g        吲哚
1mg        鏈霉親和素
氯化鋰 ( 無(wú)水 )    100g    CAS7447-41-8
二氯異香豆素溶液,，10mg/mL    5mL    130540-5
50 次        柱式酵母質(zhì)粒 DNAout
5mL        MnCl2溶液,，25mM，PCR 
10mg        apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白
100mL        動(dòng)物 DNAout
5mL        CCK-8 細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒
堿性磷酸酶,，牛小腸    500U    120404-500
Oligo dT12-18 引物,，0.5μg/μL    5μg    100814-5
500mL        Western 封堵液