詳細(xì)介紹
抗人SH3-結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞;SH3-domain binding protein圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 抗人SH3-結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞;SH3-domain binding protein圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 產(chǎn)生單克隆抗體為IgG1型,;ELISA(+),。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C23
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
鹿紅細(xì)胞膜試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T鹿紅細(xì)胞膜試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:鹿紅細(xì)胞膜試劑盒、鹿紅細(xì)胞膜試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔子免疫球E試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔子免疫球E試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子免疫球E試劑盒,、兔子免疫球E elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒、兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔可溶性凋亡相關(guān)試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔可溶性凋亡相關(guān)試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔可溶性凋亡相關(guān)試劑盒,、兔可溶性凋亡相關(guān)elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人組織酶D試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人組織酶D試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織酶D試劑盒,、人組織酶D elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A試劑盒、人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒,、人和adipoQ受體家族成員Ⅶ elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。1mL 桿菌肽溶液 ,100mg/mL
螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 100 次 130597-100
TE 緩沖液,,PH7.5 10mL 80934B-10
5次 Southern 動(dòng)物 DNAout
100mg DiOC6(3) 碘化物
15 次 非酶 DNA 清除劑 -2
1mL C41(DE3) 菌種
克必隆 eTS mRNA 擴(kuò)增試劑盒 10 次 130402-10
低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次 90211-50
40uL×4 雙脫氧 dNTP 套裝
200mL 大鼠單核細(xì)胞分離液 1.082
50mL 剝離硅烷
10mL 木瓜蛋白酶抑制劑溶液,,0.5 mg/mL
DpnI 500U 17-0040
TMB 法地高雜交試劑盒 5次 130999-5
250U Tth DNA 聚合酶
100mL 杜氏 PBS 緩沖液 ,10×
5次 PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒
10,000 milli U 三磷酸苷雙磷酸酶
微生物種屬鑒定及分型 1次 D012-1
SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 50 次 91107B-50
48 T 維生素 C 測(cè)試盒