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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>>小鼠源細胞>> 抗人SH3-結構域結合蛋白單抗雜交瘤細胞,;SH3-domain binding protein圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-23 13:47:31瀏覽次數(shù):312次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)抗人SH3-結構域結合蛋白單抗雜交瘤細胞,;SH3-domain binding protein圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 抗人SH3-結構域結合蛋白單抗雜交瘤細胞,;SH3-domain binding protein圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 產(chǎn)生單克隆抗體為IgG1型;ELISA(+),。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C23
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內,,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
鹿紅細胞膜試劑盒規(guī)格型號:96T/48T鹿紅細胞膜試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:鹿紅細胞膜試劑盒,、鹿紅細胞膜試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
兔子免疫球E試劑盒規(guī)格型號:96T/48T兔子免疫球E試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球E試劑盒,、兔子免疫球E elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
兔子可溶性血管內皮細胞C受體試劑盒規(guī)格型號:96T/48T兔子可溶性血管內皮細胞C受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子可溶性血管內皮細胞C受體試劑盒、兔子可溶性血管內皮細胞C受體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
兔可溶性凋亡相關試劑盒規(guī)格型號:96T/48T兔可溶性凋亡相關試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔可溶性凋亡相關試劑盒,、兔可溶性凋亡相關elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人組織酶D試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人組織酶D試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人組織酶D試劑盒,、人組織酶D elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。
人瘤壞死配體相關分子-1A試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人瘤壞死配體相關分子-1A試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人瘤壞死配體相關分子-1A試劑盒,、人瘤壞死配體相關分子-1A elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒,、人和adipoQ受體家族成員Ⅶ elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月,。1mL 桿菌肽溶液 ,100mg/mL
螢火蟲熒光素酶報告基因檢測試劑盒 100 次 130597-100
TE 緩沖液,PH7.5 10mL 80934B-10
5次 Southern 動物 DNAout
100mg DiOC6(3) 碘化物
15 次 非酶 DNA 清除劑 -2
1mL C41(DE3) 菌種
克必隆 eTS mRNA 擴增試劑盒 10 次 130402-10
低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次 90211-50
40uL×4 雙脫氧 dNTP 套裝
200mL 大鼠單核細胞分離液 1.082
50mL 剝離硅烷
10mL 木瓜蛋白酶抑制劑溶液,,0.5 mg/mL
DpnI 500U 17-0040
TMB 法地高雜交試劑盒 5次 130999-5
250U Tth DNA 聚合酶
100mL 杜氏 PBS 緩沖液 ,10×
5次 PCR 法 DNA 探針標記試劑盒
10,000 milli U 三磷酸苷雙磷酸酶
微生物種屬鑒定及分型 1次 D012-1
SP6 體外轉錄試劑盒 50 次 91107B-50
48 T 維生素 C 測試盒
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