詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;IE9B2F9F4說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞,;IE9B2F9F4說明書
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
人皮質(zhì)激受體β試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人皮質(zhì)激受體β試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人皮質(zhì)激受體β試劑盒、人皮質(zhì)激受體βelisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
雞流行性乙型腦炎抗體IgG試劑盒規(guī)格型號:96T/48T雞流行性乙型腦炎抗體IgG試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:雞流行性乙型腦炎抗體IgG試劑盒,、雞流行性乙型腦炎抗體IgGelisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人β位淀粉樣前體裂解酶1試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人β位淀粉樣前體裂解酶1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人β位淀粉樣前體裂解酶1試劑盒,、人β位淀粉樣前體裂解酶1elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
雞白痢抗體檢測試劑盒規(guī)格型號:96T/48T雞白痢抗體檢測試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:雞白痢抗體檢測試劑盒、雞白痢抗體檢測elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人單氧化酶A試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人單氧化酶A試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人單氧化酶A試劑盒,、人單氧化酶Aelisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人低密度脂試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人低密度脂試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人低密度脂試劑盒,、人低密度脂elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。500g 牛肉蛋白胨
10×100μL AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞
25mg Nile Red
10 次 5'-RACE 試劑盒
Rhodamine123 5mg 22-0570-5
大提柱式動物 DNAout 4次 80923-4
10mg 親和素
1mL 博萊溶液 ,10mg/mL
0.1mL 微量 RNA 助沉劑
10×100μL OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞
小鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.100 200mL 120916-200
大提柱式質(zhì)粒 DNAout 10 次 80912-10
200mL 人粒細(xì)胞分離液 1.113
1g D- 半乳糖醛酸
20 次 中草藥 DNAout
1臺 分子雜交爐
乳酸測試盒 ( 測全血 ) 48 T 18-0490-48