小鼠胚胎細胞,；BABL/C-E圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 小鼠胚胎細胞,；BABL/C-E圖片
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一13-14天的小鼠胚胎組織,。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
傳代方法  1：2傳代,；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

人孕激試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人孕激試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人孕激試劑盒,、人孕激elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月。
人高血樣試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人高血樣試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人高血樣試劑盒,、人高血樣elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月,。
人血小板相關補體3試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人血小板相關補體3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人血小板相關補體3試劑盒、人血小板相關補體3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月,。
人血管生成樣3試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人血管生成樣3試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人血管生成樣3試劑盒,、人血管生成樣3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月。
人胸腺活化調節(jié)趨化試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人胸腺活化調節(jié)趨化試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人胸腺活化調節(jié)趨化試劑盒,、人胸腺活化調節(jié)趨化elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月,。
人膀胱瘤抗原試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人膀胱瘤抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人膀胱瘤抗原試劑盒、人膀胱瘤抗原elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月,。
人內脂試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人內脂試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人內脂試劑盒,、人內脂elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月。
人美麗線蟲凋亡基因試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人美麗線蟲凋亡基因試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人美麗線蟲凋亡基因試劑盒、人美麗線蟲凋亡基因elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月,。
人磷脂酰肌醇聚3試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人磷脂酰肌醇聚3試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人磷脂酰肌醇聚3試劑盒,、人磷脂酰肌醇聚3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質期：6個月。50 次        非酶多糖清除劑 (DNA )
5g        天狼猩紅
100 次        植物種屬鑒定 PCR Mix 10
鐵氰化    500g    CAS13746-66-2
一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )     100mL    91101B-100
非酶多糖清除劑 (RNA )    10mL    60204-10
100mL        Oligo(dT) 再生溶液
50 次        Caspase 2 檢測試劑盒
15 次        血清白蛋白清除劑
50mL        丁基硫介質
RecA 蛋白    200μg     130661-200
EcoR I-Not I-BamH I 接頭    1nmol    130988-1
100μL        小鼠抗 CBP 標簽單抗
1.5mL        即用型高保真 PCR 試劑盒
500g        胰蛋白胨
2000U        BamHI
100mL        重蒸酚
Zinquin 乙酯    5mg    22-0620-5
血液 DNAout    150 次    3671-150
1g        青 G 鹽
1mL        C43(DE3) 菌種
1.5mL        RNase A 溶液,，10mg/mL