小鼠胚胎細(xì)胞,；BABL/C-E圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 小鼠胚胎細(xì)胞,；BABL/C-E圖片
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來源于一13-14天的小鼠胚胎組織,。2000年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。 
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
傳代方法  1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

人孕激試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人孕激試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人孕激試劑盒,、人孕激elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人高血樣試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人高血樣試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人高血樣試劑盒,、人高血樣elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人血小板相關(guān)補(bǔ)體3試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人血小板相關(guān)補(bǔ)體3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人血小板相關(guān)補(bǔ)體3試劑盒、人血小板相關(guān)補(bǔ)體3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人血管生成樣3試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人血管生成樣3試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人血管生成樣3試劑盒,、人血管生成樣3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化試劑盒,、人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人膀胱瘤抗原試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人膀胱瘤抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人膀胱瘤抗原試劑盒、人膀胱瘤抗原elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人內(nèi)脂試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人內(nèi)脂試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人內(nèi)脂試劑盒,、人內(nèi)脂elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人美麗線蟲凋亡基因試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人美麗線蟲凋亡基因試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人美麗線蟲凋亡基因試劑盒、人美麗線蟲凋亡基因elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人磷脂酰肌醇聚3試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人磷脂酰肌醇聚3試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人磷脂酰肌醇聚3試劑盒,、人磷脂酰肌醇聚3 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。50 次        非酶多糖清除劑 (DNA )
5g        天狼猩紅
100 次        植物種屬鑒定 PCR Mix 10
鐵氰化    500g    CAS13746-66-2
一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )     100mL    91101B-100
非酶多糖清除劑 (RNA )    10mL    60204-10
100mL        Oligo(dT) 再生溶液
50 次        Caspase 2 檢測(cè)試劑盒
15 次        血清白蛋白清除劑
50mL        丁基硫介質(zhì)
RecA 蛋白    200μg     130661-200
EcoR I-Not I-BamH I 接頭    1nmol    130988-1
100μL        小鼠抗 CBP 標(biāo)簽單抗
1.5mL        即用型高保真 PCR 試劑盒
500g        胰蛋白胨
2000U        BamHI
100mL        重蒸酚
Zinquin 乙酯    5mg    22-0620-5
血液 DNAout    150 次    3671-150
1g        青 G 鹽
1mL        C43(DE3) 菌種
1.5mL        RNase A 溶液,，10mg/mL