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小鼠肺成纖維樣細(xì)胞;C57/B6-L圖片

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更新時(shí)間:2017-01-23 13:48:49瀏覽次數(shù):498

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠肺成纖維樣細(xì)胞,;C57/B6-L圖片售后:收到細(xì)胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),,應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決,。

詳細(xì)介紹

小鼠肺成纖維樣細(xì)胞,;C57/B6-L圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱 小鼠肺成纖維樣細(xì)胞,;C57/B6-L圖片
形態(tài)特性  成纖維樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來(lái)源于一正常雄性C57/B6小鼠的肺組織。2013年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR  -
同工酶 無(wú)
染色體 
使用權(quán)限 A類

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

人羰基化試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人羰基化試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人羰基化試劑盒、人羰基化elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人胃泌試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人胃泌試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人胃泌試劑盒,、人胃泌elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人皮質(zhì)激受體α試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人皮質(zhì)激受體α試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人皮質(zhì)激受體α試劑盒,、人皮質(zhì)激受體αelisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒、雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人水通道4試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人水通道4試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人水通道4試劑盒,、人水通道4elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
雞白介1β試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T雞白介1β試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:雞白介1β試劑盒,、雞白介1βelisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人S試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人S試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人S試劑盒、人Selisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人低密度脂免疫復(fù)合物試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人低密度脂免疫復(fù)合物試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人低密度脂免疫復(fù)合物試劑盒,、人低密度脂免疫復(fù)合物elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月,。5g        金精三羧酸
100g        氯化膽堿
100 次        細(xì)胞計(jì)數(shù)液 (Vi-CELL 儀 )
果膠酶 Y-23    100mg    CAS9032-75-1
丁基介質(zhì)    50mL    130426-50
5次        中提柱式 BAC DNAout
5μg        lambda(λ)DNA
500U        丁酰膽堿酯酶
20 次        雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-APC·7-AAD) 
S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石    25mg    CAS98185-20-7
低 pH 緩沖液套裝    30 次    100830-30
1000μL        組蛋白 3.1 小鼠單抗
100g        氯化膽堿
1g        多聚半乳糖醛
250 T        過(guò)氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )
磷酸二酯酶Ⅰ    100U    CAS9025-82-5
魯米諾血跡鑒定試劑盒    100mL    140646-100
真菌 RNAout    250 次    60305-250

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