雜交瘤細(xì)胞株；K3L35說(shuō)明書采用干冰保存運(yùn)輸,。收到細(xì)胞時(shí),，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),；若尚留有干冰,，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。

雜交瘤細(xì)胞株；K3L35說(shuō)明書【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱雜交瘤細(xì)胞株,；K3L35說(shuō)明書
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

小鼠抗小核核試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T小鼠抗小核核試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗小核核試劑盒,、小鼠抗小核核elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
兔子可溶性CD40配體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔子可溶性CD40配體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
兔子端粒酶試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔子端粒酶試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子端粒酶試劑盒,、兔子端粒酶elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔抗平滑肌抗體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔抗平滑肌抗體試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗平滑肌抗體試劑盒,、兔抗平滑肌抗體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人組試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人組試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人組試劑盒、人組elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人瘤壞死可溶性受體Ⅰ試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人瘤壞死可溶性受體Ⅰ試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人瘤壞死可溶性受體Ⅰ試劑盒,、人瘤壞死可溶性受體Ⅰelisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。50 次        細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-PE）
琥珀酸 ( 丁二酸 )    25g    CAS110-15-6
預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (14.4-97.4KD)    10 次    70704A-10
1g        α- 糜蛋白酶
100g        氯化鎂六水
250mg        核酸組蛋白 ( 小牛胸 )
50 T        活性氧 ( 羥自由基 ) 測(cè)試盒 ( 比色法 )
金黃色葡萄菌 V8 蛋白酶    1mg    CAS66676-43-5
Earle 溶液    100mL    100806-100
大提柱式真菌 RNAout    5次    80904-5
0.5mL        NTP 溶液,，10mM
10mg        6- 羧基二熒光素
100mg        Calcein
20L        長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(2-30KD)
CFDA SE ( 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針 )    5mg    22-0120-5
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 盒裝已滅菌 )    1000 支    17-017-1000
25mg        嘌呤鹽
10 次        百萬(wàn)堿基動(dòng)物 DNAout
50mg        S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 )
10000U        T3 RNA 聚合酶
人魚精1試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人魚精1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人魚精1試劑盒,、人魚精1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人高血樣1試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人高血樣1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人高血樣1試劑盒、人高血樣1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人血小板生成試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人血小板生成試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人血小板生成試劑盒、人血小板生成elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月,。