詳細介紹
雜交瘤細胞株,;5G2價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
雜交瘤細胞株,;5G2價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
RNF133 環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml
HLA-DR HLA-DR抗體規(guī)格: 0.2ml
RNF15 環(huán)指蛋白15抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
HER3/ErbB3 HER3受體抗體規(guī)格: 0.2ml
FAM135B FAM135B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml
GST tag/GSTM1 GST標(biāo)簽蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
KCTD12 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.3ml
GLUT1 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化鈣調(diào)節(jié)素抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
NARG2 谷氨酸受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉(zhuǎn)運蛋白1家族蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgM規(guī)格: 0.1ml25g 葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒
10mL 鈷柱介質(zhì)
硫酸慶大 500mg CAS1405-41-0
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動子 ) 200mL 100825-200
10 次 一站式生物素 TUNEL 試劑盒 (FITC/POD)
500U 堿性磷酸酶,,牛小腸
25g 琥珀酸,,六水
60μL 驢抗山羊 IgG,堿性磷酸酶標(biāo)記
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 25g CAS617-04-9
小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗 100μL 130574-100
48 T 脂褐質(zhì)測試盒
2mg L- 氨基酸氧化酶
25g 卵磷脂 ( 大豆 )
10×100μL Y187 酵母感受態(tài)細胞
水楊酸 25g CAS69-72-7
咪唑溶液,,2M 100mL 131222-100
50 次 柱式細菌 RNAout
1mg 磷脂酶 A2
25g 玉米蛋白
1000 支 1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝 )