詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株,;macroglobulin-M-01價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
雜交瘤細(xì)胞株,;macroglobulin-M-01價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
AEG-1/LYRIC AEG-1抗體 0.2ml
Phospho-MARCKS (Ser162) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體規(guī)格: 0.1ml
EML3 微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
HIP4/CBS 絲氨酸羧甲半胱氨酸合成酶抗體 0.1ml
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體()規(guī)格: 0.1ml
ATG9B 自噬相關(guān)蛋白9B抗體規(guī)格: 0.2ml
ABCF1 ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 0.1ml
phospho-KLF5(Ser275) 磷酸化KLF5抗體規(guī)格: 0.1ml
PGGT1A/FNTA 蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1α抗體規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Integrin alpha 3/CD49c 整合素α3抗體規(guī)格: 0.1ml
Hexokinase II/HxK2 己糖激酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgG規(guī)格: 0.1ml
IL-13Ra1 白細(xì)胞介素-13受體a1抗體規(guī)格: 0.1ml
Proteasome 20S beta 7 蛋白酶體PSMβ7抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈規(guī)格: 0.1ml
Cytochrome B/MT-CYB 細(xì)胞色素B抗體規(guī)格: 0.2ml
RNF128 環(huán)指蛋白128抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml
MHC Class II/MRC OX-6 組織相容性復(fù)合體2抗體規(guī)格: 0.1ml
RNF13 環(huán)指蛋白13抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG規(guī)格: 0.1ml1mL EDTA 溶液,,0.2M
300U 無 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL
1袋 顯影粉
N- 氨基甲酰甲基乙磺酸 5g CAS7365-82-4
動物種屬鑒定 PCR Mix 6 100 次 131128F-100
1500U XbaI
24 T 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測試盒
250mg 碘硝基四唑紫嘌呤
30 次 柱式石蠟包埋組織 DNAout
α- 糜蛋白酶 1g CAS9004-07-3
BL21 菌種 1mL 12-174
1g 溴甲酚綠
600U 核糖核酸酶 H
100mg D- 果糖 -1,6- 二磷
8次 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒
D- 氨基葡萄糖鹽 10g CAS66-84-2
LB 平板培養(yǎng)基 (Kan 抗性 ) 10 塊 130848C-10
25 次 一站式真菌 mRNAout
5g 堿性品紅
5g N- 乙酰 -L- 半胱氨酸