雜交瘤細胞株,；5H1E9E8D7H12圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。

細胞名稱 雜交瘤細胞株,；5H1E9E8D7H12圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開,。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

phospho-RAD9(Ser387)  磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-HRH1(Ser398)  磷酸化組胺受體H1抗體規(guī)格: 0.1ml
PEA15  星形膠質(zhì)細胞PEA15抗體規(guī)格: 0.2ml
bFGF/FGF2  堿性成纖維細胞生因子抗體規(guī)格: 0.1ml
RLBP1L1  視黃醛結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-PAK1/2/3(Thr423)  磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體規(guī)格: 0.1ml
Aurora B/STK-1  有絲分裂激酶B抗體規(guī)格: 0.1ml
MFGE8/BA46  腺上皮細胞抗原BA46抗體規(guī)格: 0.2ml
MKK3/MEK3  絲裂原活化蛋白激酶MKK3抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-GIT1(Tyr510)   磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1規(guī)格: 0.1ml
APOC4/Apolipoprotein CIV  載脂蛋白C4抗體規(guī)格: 0.2ml
Nrf2  核因子2相關(guān)因子2抗體規(guī)格: 0.1ml
PCDHGA5  原鈣粘蛋白γA5抗體規(guī)格: 0.2ml
PIG3/TP53I3  p53誘導(dǎo)蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
NAIF1 protein  核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1規(guī)格: 0.2ml
Amphiregulin  雙調(diào)蛋白（結(jié)腸直腸細胞源性生因子）抗體規(guī)格: 0.1ml
SORBS2/ArgBP2  氨酸結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-CSF1R (Tyr723)  磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml
ANKMY1  睪特異性錨樣蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-c-Abl(Tyr276)  磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
KLK3/Prostate Specific Antigen  激肽釋放酶3/舒血管素3抗體規(guī)格: 0.2ml5mg        CFDA SE ( 細胞增殖示蹤熒光探針 )
12 塊        SDS-PAGE 預(yù)制膠
Cyanine 5-NHS Ester    12x50nm    22-0150-12
1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝帶芯 )    1000 支    17-020-1000
5ku        蘋果酸脫氫酶
10 次        百萬堿基血液 DNAout
65KU        SOD( 抗氧化酶 )
2500U        末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 (TdT)
SP600125(JNK 抑制劑 )    5mg    23-0730-5
細菌 DNAout    50 次    60707-50
100mL        RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0
250mL        超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測試劑盒（ECL）
100mL        超培養(yǎng)基
1mL        衣溶液 ,5mg/mL
H5N1 神經(jīng)氨酸酶抑制劑鑒定試劑盒    100 次     18-0100-100
DNA  Tris HCl,，1M,，pH8.5    100mL    101207-100
0.1mg        Staurosporine(PKC 抑制劑 )
50 次        DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)
50 次        柱式病毒 RNAout
1mL        Origami B(DE3) 菌種