雜交瘤細胞株,；8-1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 雜交瘤細胞株,；8-1圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現用現配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產品全部經過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內,，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

MVD  甲羥戊酸脫羧酶抗體規(guī)格: 0.1ml
C22orf36  22號染色體開放閱讀框36抗體規(guī)格: 0.2ml
CAMTA1  鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體規(guī)格: 0.2ml
MYL3/Myosin light chain 3  肌球蛋白輕鏈3抗體規(guī)格: 0.2ml
Hemoglobin α  糖化血紅蛋白α抗體規(guī)格: 0.2ml
CD45/B220  白細胞共同抗原抗體規(guī)格: 0.1ml
MASP2  甘露聚糖結合凝集素絲氨酸肽酶2抗體規(guī)格: 0.1ml
APP695 (CT)  淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）規(guī)格: 0.1ml
Adducin protein  內收蛋白抗體 0.1ml
Lysozyme  溶菌酶抗體規(guī)格: 0.1ml
LCE1A  晚期包膜蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
ACADVL  ?；o酶A脫氫酶很鏈抗體 0.2ml
LATS1  瘤抑制基因LATS1抗體規(guī)格: 0.2ml
C17orf53  17號染色體開放閱讀框53抗體規(guī)格: 0.2ml
AAK1  AP2關聯(lián)激酶1抗體 0.2ml
JNK1/2/3  氨基末端激酶1/2/3抗體規(guī)格: 0.1ml
PIGA  紅細胞磷脂酰肌醇聚糖A抗體規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的驢抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml25g        牛膽酸
50 次        FTA 血片 DNAout
放線酮    100mg    CAS66-81-9
BJ5183 菌種    1mL    12-184
1.5mL        溴化乙錠溶液 ,10 mg/mL
100mg        核糖核酸酶 B
100g        吸附樹脂 XAD7
1mg        谷胱甘肽 S 轉移酶
γ- 球蛋白 ( 牛血 )    1g    CAS9007-83-4
LB 平板培養(yǎng)基 (Amp 抗性 )    10 塊    130848B-10
30 次        一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)
48 T        堿性磷酸酶測試劑盒
100mg        4- 甲基傘形酮 -β-D- 葡糖苷酸
1000μL        山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記
甲叉雙丙烯酰胺    25g    CAS110-26-9
小鼠抗 HA 標簽單抗    100μL    130576-100
10g        植酸
100g        L- 谷氨酸
100g        麥芽提取物